Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Latar belakang : Angka kejadian infertilitas di Indonesia diperkirakan kurang lebih mencapai 6% atau terdapat kurang lebih 3-4,5 juta pasangan yang mengalami kesulitan mempunyai keturunan. Pada tahun 2012 dilaporkan bahwa 28,4% siklus merupakan transfer embrio beku dibandingkan pada tahun 2003 dimana dilaporkan siklus embrio beku dilakukan hanya 16,1% pada program Fertilisasi In Vitro (FIV). Walaupun transfer embrio beku telah semakin sering dilakukan, tetapi metode untuk persiapan endometrium yang paling efektif, antara alamiah atau artifisial, masih belum diketahui secara jelas. Tahap persiapan endometrium sebelum transfer embrio merupakan tahap yang sangat penting dalammencapai reseptivitas endometrium dan keberhasilan kehamilan. Tujuan : Mengetahui luaran program FIV pada transfer embrio beku dengan metode alamiah dan artifisial di Klinik Yasmin, RSCM Kencana. Metode : Penelitian ini merupakan penelitian retrospektif analitik dengan menggunakan metode uji potong lintang, periode 1 Januari 2011-31 Desember 2018. Pengambilan sampel dengan cara total sampling. Subjek penelitian ini merupakan seluruh wanita yang mengikuti FIV dengan tranfer embrio beku yang memenuhi kriteria inklusi dan ekslusi yang dilakukan di RSCM. Data yang didapatkan dianalisis secara bivariat menggunakan uji chi-square untuk mengetahui angka implantasi dan kehamilan pada transfer embrio beku dengan metode alamiah dan artifisial. Hasil : Dari 147 subyek yang memenuhi kriteria penelitian, didapatkan 19 subyek menjalani persiapan endometrium dengan metode alamiah dan 128 menjalani persiapan endometrium dengan metode artifisial. Angka implantasi metode alamiah vs metode artifisial (32 % vs 29%); angka kehamilan biokimiawi (89,5% vs 53,1%; p < 0,05); angka kehamilan klinis (42,1% vs 34,4%; p > 0,05); serta angka kehamilan lanjutan (36,8% vs  28,9%; p > 0,05). Kesimpulan :  Persiapan endometrium secara alamiah memiliki kecenderungan lebih tinggi untuk terjadinya implantasi dan kehamilan biokimiawi dibandingkan persiapan secara artifisial. Sedangkan angka kehamilan klinis dan kehamilan lanjutan tidak berbeda bermakna. Diperlukan penelitian lanjutan untuk menambah besar sampel, terutama pada kelompok persiapan endometrium secara alamiah.

---

Background : Infertility incidence in Indonesia is estimated to reach approximately 6% or approximately 34.5 million couples who have difficulty having children. In 2012 it was reported that 28.4% of cycles were frozen embryo transfers compared to 2003 where it was reported that only frozen embryo cycles performed only 16.1% in the In Vitro Fertilization (FIV) program. Although frozen embryo transfers have increasingly been done, the most effective method for endometrium, between natural or artificial, is still not clearly known. The endometrial preparation stage before embryo transfer is a very important stage in achieving endometrial receptivity and the success of pregnancy. Objective : Knowing the outcome of the FIV program on frozen embryo transfer using natural and artificial methods at the Yasmin Clinic RSCM Kencana. Methods : This research was an restropective analytical study using a cross-sectional test method for the period of January 1, 2011-December 31, 2018. Sampling by total sampling. The subjects of this study were all women who took part in FIV with frozen embryo transfer that met the inclusion and exclusion criteria performed at RSCM. The data obtained were analyzed bivariately using the chi-square test to determine implantation and pregnancy rates in frozen embryo transfer using natural and artificial methods. Results : 1 47 subjects who met the study criteria, 19 subjects underwent endometrial preparation by natural methods and 128 were subjects who underwent endometrial preparation by artificial methods. The rate of implantation of natural methods vs. artificial methods (32% vs 29 %); biochemical pregnancy rates (89,5% vs 53,1%; p < 0,05); clinical pregnancy rate (42,1% vs 34,4%; p > 0,05) and on going  pregnancy rates (36.8% vs 2 8,9%; p > 0,05). Conclusion : Natural endometrial preparations have a higher tendency for implantation and biochemical pregnancy, while  clinical pregnancy rate and on going pregnancies not significantly difference. Further research is needed to increase sample size, especially in natural preparation group."

"Ketimpangan antara kadar vitamin D25(OH) rendah dan keadaan resistensi insulin pada penderita SOPK dengan anovulasi kronik menarik untuk digali lebih jauh. Anovulasi kronik pada SOPK diyakini disebabkan terhentinya pertumbuhan folikel di ovarium. Pada resistensi insulin, vitamin D diperkirakan berperan di sel sasaran dengan menambah substrat reseptor insulin. Perlu diungkap pengaruh vitamin D terhadap pertumbuhan folikel ovarium dengan mengukur kadar AMH, kemudian diperbandingkan antara penderita S-OPK-RI dan SOPK-nir-RI berdasarkan perubahan kadar reseptor insulin darah. Penelitian ini bertujuan menentukan pengaruh pemberian vitamin D3 terhadap pertum-buhan folikel ovarium dan penurunan kadar AMH melalui jalur reseptor insulin dan resep-tor vitamin D darah. Penelitian dua tahap dilakukan dari 14 Agustus 2018 hingga 25 Fe-bruari 2019 terhadap 35 subjek SOPK-RI dan 35 subjek SOPK-nir-RI di Poliklinik Infer-tilitas dan Endokrinologi Departemen Obstetri dan Ginekologi RSPAD Gatot Soebroto (RSGS), Jakarta. Tahap pertama adalah iris-silang antara SOPK-RI dan nir-RI untuk mem-bandingkan kadar vitamin D25(OH), AMH, reseptor insulin dan reseptor vitamin D darah. Tahap kedua adalah uji kuasi-eksprimental untuk mengetahui pengaruh pemberian vitamin D3 12.000 IU per minggu selama tiga bulan terhadap pertumbuhan folikel dengan peman-tauan USG-transvaginal atau transrektal sebulan sekali dan kadar AMH pada SOPK-RI dan nir-RI. Kadar glukosa puasa, insulin puasa, vitamin D25(OH), AMH diukur dari darah. Reseptor vitamin D darah dan reseptor insulin darah diperiksa dari sel mononukleus darah tepi (SMDT). Hasil penelitian memperlihatkan bahwa: (1) prapemberian vitamin D3 nilai yang berbeda bermakna antara SOPK-RI dan SOPK-nir-RI adalah kadar glukosa puasa (84 vs. 78 mg/dL; p = 0,016), insulin puasa (20,3 vs. 7,49 μIU/mL; p < 0,001) (2) pascapemberian vitamin D3 yang berbeda bermakna adalah kadar glukosa puasa (82 vs. 79 mg/dL; p = 0,049), insulin puasa (23,19 vs. 10,54; p < 0,001), reseptor insulin lebih tinggi pada SOPK-RI diban-dingkan SOPK-nir-RI (18,80 vs. 14,78 ng/mL; p = 0,020), reseptor vitamin D pada SOPK-nir-RI menurun bermakna (63,29%); (3) pascapemberian vitamin D3 ditemukan: (a) delta perubahan kadar vitamin D25(OH) pasca (8,38 ng/mL (63,4%) [SD 4,06] SOPK-RI vs. 12,31 ng/mL (10,29%) SOPK-nir-RI, p < 0,001); (b) delta perubahan penurunan kadar AMH pasca SOPK RI 10,29 vs. SOPK-nir-RI 14,61%; p = 0,492); (c) delta peningkatan diameter folikel antara dua kelompok SPOK meningkat pada bulan pertama (14,3% vs. 50%), kedua (33,3% vs. 66,7%), dan ketiga (50% vs. 66,7%), tetapi yang berbeda bermak-na (p < 0,05) hanya pada bulan pertama, yaitu lebih besar pada SOPK-nir-RI. Disimpulkan bahwa vitamin D3 menurunkan kadar AMH pada SOPK-RI dan SOPK-nir-RI, serta meningkatkan pertumbuhan folikel pada kededua kelompok SOPK, pada bulan pertama perubahan diameter folikel lebih besar pada SOPK nir-RI. Prapemberian vitamin D3 tidak ditemukan perbedaan kadar reseptor insulin dan reseptor vitamin D pada kededua kelompok SOPK, sedangkan pascapemberian vitamin D3 terdapat penurunan kadar reseptor vitamin D pada SOPK-nir-RI.

---

Discrepancy between low-level vitamin 25(OH)D and insulin resistance in PCOS patients with chronic anovulation required to be further explored. Chronic anovulation in PCOS is believed to be caused by the follicular arrest in the ovary. In insulin resistance the vitamin D is thought to play a role in target cell by adding the insulin receptor substrate. It is nec-essary to elucidate the effect of vitamin D on the ovarian folliculogenesis by measuring the AMH levels, which are then compared between patients with IR-PCOS and non-IR-PCOS based on the changes in blood insulin receptor levels. The aim of this study is to determine the effect of vitamin D3 administration on ovarian follicular growth and reduction of AMH through insulin receptor and blood vitamin D re-ceptor pathways. The two stages study was carried out from 14th August 2018 to 25th February 2019 on 35 IR-PCOS and 35 non-IR-PCOS subjects at the Infertility and Endo-crinology Out-patient Clinic, Department of Obstetrics and Gynecology, Gatot Soebroto Central Army Hospital (RSGS), Jakarta. The first stage was a cross-section study between IR-PCOS and non-IR-PCOS to compare levels of vitamin 25(OH)D, AMH, blood insulin receptors and vitamin D receptors; the second is a quasi-experimental test to determine the effect of 12,000 IU vitamin D3 administration per week for 3 months on follicular growth with transvaginal or transrectal ultrasound monthly and AMH levels on IR-PCOS-and non-IR-PCOS. Fasting glucose, fasting insulin, vitamin D25(OH), AMH levels are measured from the blood. Blood vitamin D receptor and insulin receptor were measured from the peripheral blood mononuclear cells (PBMC). The results of the study demonstrated that: (1) before administration of vitamin D3, there were differences in fasting glucose (84 vs. 78 mg/dL; p = 0.016) and fasting insulin (20.3 vs. 7.49 μIU/mL; p < 0.001) between the two groups; (2) after vitamin D3 administration, significant differences were found between the two groups for the levels of fasting glucose (82 vs. 79 mg / dL; p = 0.049), fasting insulin (23.19 vs. 10.54; p < 0.001); higher insulin receptors was found in IR-PCOS compared to non-IR-PCOS (18.80 vs. 14.78 ng / mL; p = 0.020), the vitamin D receptors in non-IR-PCOS decreased significantly (63.29%); (3) vitamin 25(OH)D levels before vitamin D3 administration were not significantly different in the two groups (13.84 vs. 10.97 ng/mL; p = 0.327), while after vitamin D3 administration the levels increased significantly (8.38 ng/mL (63.4%) [SD 4.06] in IR-PCOS vs. 12.31 ng/mL (10.29%) in non-IR-PCOS, p < 0.001); (4) AMH levels decreased in the both groups after vitamin D3 admin-istration but the ratio of the decrease was not significantly different (10.29 vs. 14.61%; p = 0.492); (5) follicular diameter between the two groups increased in the first month (14.3% vs. 50%), the second month (33.3% vs. 66.7%), and the third month (50% vs. 66.7% ) after vitamin D3 administration, but the significant difference (< 0.05) was demonstrated only in the first month, which was greater in non-IR-PCOS than that in the IR-PCOS. It is concluded that vitamin D3 decreases AMH levels in both IR-PCOS and non-IR-PCOS. It increases folliculogenesis in both PCOS groups; in the first month, the changes in follic-ular diameter are greater in non-IR-PCOS. Before vitamin D3 administration, there is no difference in the levels of insulin receptors and vitamin D receptors between the two groups, whereas after vitamin D3 administration there is a decrease in the levels of vitamin D re-ceptors in non-IR-PCOS. Keywords: AMH, IR-PCOS, non-IR-PCOS, PBMC, vitamin D receptor, insulin receptor, vitamin D25(OH)."

"Tujuan: Faktor embrio sangat mempengaruhi hasil dari fertilization in vitro (FIV). Salah satu metode untuk memastikan embrio tidak memiliki kromosom aneuploid adalah Prosedur Pengujian Genetik Praimplantasi untuk Aneuploidi atau Skrining Genetik Praimplantasi, yang melibatkan biopsi blastomer pada fase 8 sel atau trofektoderm pada fase blastokista. Prosedur ini merupakan prosedur yang invasif dan berpotensi membahayakan embrio.Metode: Penelitian adalah penelitian cross-sectional pada pasien program FIV yang dilanjutkan dengan pemeriksaan kromosom dengan NGS di Pusat IVF RS Pondok Indah dan Pusat FIV Morula RS Bunda pada bulan Desember 2021 sampai dengan Desember 2022. Embrio yang mencapai stadium blastokista pada hari ke 5 atau 6 dibersihkan dan dimasukkan ke dalam tabung PCR selama seminggu; dilanjutkan dengan anotasi oleh embriologi untuk menentukan penilaian morfologi dan parameter morfokinetik menggunakan Microscopcopy Time-Lapse. Uji chi-square digunakan untuk menganalisis variabel bivariat.Hasil: Seratus dua puluh empat sampel didapatkan pada hari ke 5 pasien yang menjalani prosedur FIV. Sebanyak 50,8% memiliki kromosom aneuploid, dan 49,2% adalah euploid. Median karakteristik morfokinetik yaitu 3,86 kali lipat. Ditemukan bahwa tingkat ekspansi, time to pro-nuclear fading, dan time to the synchrony of the third cell cycle berhubungan secara signifikan dengan status euploid (p = =0,000; 0,041 dan 0,036).Kesimpulan: Tingkat ekspansi terbukti secara bermakna memiliki pengaruh dalam memprediksi status ploidi embrio.Metode: Penelitian adalah penelitian cross-sectional pada pasien program FIV yang dilanjutkan dengan pemeriksaan kromosom dengan NGS di Pusat IVF RS Pondok Indah dan Pusat FIV Morula RS Bunda pada bulan Desember 2021 sampai dengan Desember 2022. Embrio yang mencapai stadium blastokista pada hari ke 5 atau 6 dibersihkan dan dimasukkan ke dalam tabung PCR selama seminggu; dilanjutkan dengan anotasi oleh embriologi untuk menentukan penilaian morfologi dan parameter morfokinetik menggunakan Microscopcopy Time-Lapse. Uji chi-square digunakan untuk menganalisis variabel bivariat.Hasil: Seratus dua puluh empat sampel didapatkan pada hari ke 5 pasien yang menjalani prosedur FIV. Sebanyak 50,8% memiliki kromosom aneuploid, dan 49,2% adalah euploid. Median karakteristik morfokinetik yaitu 3,86 kali lipat. Ditemukan bahwa tingkat ekspansi, time to pro-nuclear fading, dan time to the synchrony of the third cell cycle berhubungan secara signifikan dengan status euploid (p = =0,000; 0,041 dan 0,036).Kesimpulan: Tingkat ekspansi terbukti secara bermakna memiliki pengaruh dalam memprediksi status ploidi embio.

---

Objective : Embryonic factors greatly influence IVF outcomes. One method to ensure the embryo does not have aneuploid chromosomes is Preimplantation Genetic Testing for Aneuploidy or Preimplantation Genetic Screening procedure, which involves undergoing a biopsy of the blastomeres in the 8-cell phase or the trophectoderm in the blastocyst phase. The procedure is invasive and can potentially harm the embryo.

Methods: This study is a cross-sectional that requires patients undergoing IVF followed by chromosome examination with NGS that was conducted at the IVF Center at Pondok Indah Hospital and Morula IVF Center at Bunda Hospital from December 2021 to December 2022. Each embryo that reaches the blastocyst stage on day 5 or 6 will be washed and put into a PCR tube for a week; then, embryologists annotate them to determine morphological assessment and morphokinetic parameters using Time-Lapse Microscopy. The chi-square test was used to analyse bivariate variables.

Results: One hundred twenty four samples were collected on day 5 of patients undergoing the IVF procedure. 50.8% of the samples were aneuploid chromosomes, and 49.2% were euploid. The morphokinetic characteristics median was 3.86 fold. It was found that expansion grade, time to pro-nuclear fading, and time to the synchrony of the third cell cycle were significantly associated with euploid status (p = =0.000; 0.041 and 0.036).

Conclusion: The expansion grade has been proven as the most influential component for accurately predicting the ploidy status of embryos."

"Latar belakang: Fertilisasi in vitro (FIV) merupakan salah satu metode tata laksana infertilitas yang paling banyak dilakukan di dunia. Kualitas embrio pada FIV sangat dipengaruhi oleh jumlah dan kualitas oosit. Kadar AMH merupakan marka yang rutin diperiksakan pada peserta program FIV. Namun, belum diketahui secara jelas hubungan AMH dengan kualitas dan jumlah oosit.Metode: Penelitian ini merupakan studi analitik observasional retrospektif dengan desain potong lintang pada seluruh peserta program FIV usia 18-45 tahun di Klinik Yasmin, RSCM Kencana, Jakarta, pada periode Januari 2013 hingga Desember 2019. Pengambilan sampel dilakukan secara total sampling. Subjek dengan data tidak lengkap, memiliki etiologi infertilitas berupa sindrom ovarium polikistik, endometriosis, dan faktor sperma dieksklusi dari penelitian. Data kadar AMH, jumlah oosit total, oosit matur, oosit terfertilisasi, dan laju fertilisasi didapatkan oleh pasien.Hasil: Didapatkan sebanyak 692 subjek yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi. Pada analisis bivariat, didapatkan korelasi kuat antara kadar AMH dengan jumlah oosit total (r = 0,650, p < 0,001), jumlah oosit matur (r = 0,642, p < 0,001), dan jumlah oosit terfertilisasi (r = 0,607, p < 0,001), sedangkan tidak didapatkan korelasi antara kadar AMH dengan laju fertilisasi (r = 0,076, p = 0,049). Setelah dilakukan kontrol terhadap usia dan indeks massa tubuh, didapatkan korelasi antara kadar AMH dengan jumlah oosit total, jumlah oosit matur, jumlah oosit terfertilisasi, dan laju fertilisasi (p < 0,05). Berdasarkan analisis, nilai titik potong kadar AMH serum untuk memprediksi jumlah oosit optimal adalah 1.615 ng/mL (sensitifitas 77%, spesifisitas 77.3%).Simpulan: Kadar AMH serum berkorelasi dengan jumlah oosit total, jumlah oosit matur, jumlah oosit terfertilisasi, dan laju fertilisasi

---

Background: In vitro fertilization (FIV) is one of the most widely practiced infertility treatment methods in the world. The quality of embryos in FIV is strongly influenced by the number and quality of oocytes. AMH level is a marker routinely checked on FIV program participants. However, it is not clear the relationship between AMH and the quality and quantity of oocytes.

Method: This study is a retrospective observational analytic study with a cross-sectional design on all FIV program participants aged 18-45 years at the Yasmin Clinic, RSCM Kencana, Jakarta, from January 2013 to December 2019. Sampling was carried out by total sampling. Subjects with incomplete data, having infertility etiology in the form of polycystic ovary syndrome, endometriosis, and sperm factors were excluded from the study. Data on AMH levels, total oocyte count, mature oocytes, fertilized oocytes, and fertilization rate were obtained by the patient.

Result: There were 692 subjects who met the inclusion and exclusion criteria. In the bivariate analysis, there was a strong correlation between AMH levels and the total number of oocytes (r = 0.650, p <0.001), the number of mature oocytes (r = 0.642, p <0.001), and the number of fertilized oocytes (r = 0.607, p <0.001), whereas there was no correlation between AMH levels and fertilization rate (r = 0.076, p = 0.049). After controlling age and body mass index, a correlation was found between AMH levels with total oocyte count, mature oocyte count, fertilized oocyte count, and fertilization rate (p <0.05). Based on the analysis, cut-off of AMH level to predict optimal total oocyte is 1.615 ng/mL (sensitivity 77%, specificity 77.3%).

Conclusion: Serum AMH levels correlate with the total number of oocytes, the number of mature oocytes, the number of fertilized oocytes, and fertilization rate."

"Pengawetan fungsi reproduksi dengan simpan beku oosit matur tidak dapat dilakukan pada pasien kanker, sehingga simpan beku oosit imatur menjadi pilihan. Simpan beku oosit imatur masih terkendala angka maturasi dan fertilisasi yang rendah. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi pengaruh vitrifikasi sel kumulus granulosa sebagai representasi maturitas dan kualitas oosit matur dan imatur. Penanda maturitas adalah GDF-9, BMP-15, FSHR, LHR, dan koneksin-37, sedangkan kaspase-3 dan survivin sebagai penanda kualitas. Kadar protein total dan protein spesifik penanda maturitas (FSHR, LHR) dan kualitas (kaspase-3) oosit juga diteliti untuk memperoleh gambaran komprehensif pascavitrifikasi.Disain penelitian adalah true eksperimental in-vitro, dilakukan dari bulan Juli 2020 sampai Februari 2022. Subjek penelitian adalah pasien yang menjalani program fertilisasi in-vitro di klinik bayi tabung Morula IVF, RSIA Bunda Jakarta. Sampel sel kumulus-granulosa dari 38 pasien dengan diagnosis sindrom ovarium polikistik (SOPK) dianalisis. Prosedur vitrifikasi dilakukan dengan memajan sel kumulus-granulosa pada medium ekuilibrasi (VS1, 15% etilen glikol) selama 5 menit dan medium vitrifikasi (VS2, 15% etilen glikol, 15% dimethyl sulfoxide dan 0,5 M sukrosa) selama 30 detik. Sel kumulus-granulosa dimasukkan secara cepat ke nitrogen cair (suhu -196 oC). Setelah 5 menit, sampel dihangatkan dengan memajankan larutan sukrosa bertingkat 0,5 M, 0,25 M, 0.125 M. Metode real-time quantitative polimerase chain reaction (rt-qPCR) digunakan untuk mengukur ekspresi relatif dan sandwich Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) untuk mengukur kadar protein. Analisis data menggunakan T-independent atau Mann-Whitney. Analisis ekspresi relatif gen target level mRNA menggunakan rumus Pfaffl.Didapatkan kadar protein total yang tidak berbeda bermakna antara sel kumulus-granulosa oosit matur dan imatur (30 µg/mL dan 12,5 µg/mL, nilai p > 0,05). Kadar protein spesifik FSHR, LHR dan Kaspase-3 juga tidak berbeda bermakna antara kelompok oosit matur dan imatur (masing-masing adalah 0,47 µg/mL dan 0,48 µg/mL, 0,1 µg/mL dan 0,09 µg/mL, 0.51 µg/mL dan 0.58 µg/mL, nilai p > 0,05). Tidak terdapat perbedaan bermakna ekspresi relatif BMP-15, LHR dan koneksin-37 pascavitrifikasi pada kelompok sel kumulus-granulosa oosit matur dan imatur (masing-masing 1,6 dan 1,4 kali untuk BMP-15, 2,3 dan 2,3 kali untuk LHR, 0,9 dan 0,9 kali untuk koneksin-37, nilai p < 0,01). Didapatkan penurunan bermakna ekspresi relatif GDF-9 dan FSHR pada kelompok sel kumulus-granulosa oosit matur dan imatur (masing-masing 0,2 dan 0,1 kali untuk GDF-9, 0,3 dan 0,02 kali untuk FSHR, nilai p < 0,01). Ekspresi relatif gen penanda kualitas oosit matur dan imatur yaitu survivin dan kasapase-3 tidak berubah pascavitrifikasi (1,3 dan 1,2 kali untuk survivin, 0,7 dan 0,8 kali untuk kaspase-3, nilai p > 0,05). Analisis kadar protein FSHR, LHR, dan kaspase-3 pascavitrifikasi menunjukkan bahwa vitrifikasi tidak mengubah ekspresi gen sel kumulus granulosa oosit matur dan imatur (masing-masing adalah 0,4;0,4 µg/mL dan 0;4;0,5 µg/mL untuk FSHR, 0,1;0,1 µg/mL dan 0,1;0,1 µg/mL untuk LHR, 1,9;1,5 µg/mL dan 1,7;1,6 µg/mL untuk kaspase-3, nilai p > 0,05).Disimpulkan simpan beku sel kumulus-granulosa dengan metode vitrifikasi tidak mengubah ekspresi gen penanda maturitas dan kualitas oosit kecuali GDF-9 dan FSHR. Vitrifikasi terbukti aman untuk mempertahankan viabilitas sel kumulus-granulosa sebagai representasi kesintasan oosit matur dan imatur.

---

Fertility preservation through mature oocytes cannot be recommended for cancer patients and immature oocytes is preferable. However, immature oocyte vitrification remains unfavorable due to low number of mature oocytes as well as low fertilizability post-warming. This study aimed to investigate the effect of cumulus-granulosa cells' vitrification on maturity and quality-associated markers of mature and immature oocytes as an indirect assessment. Expression of GDF-9, BMP-15, FSHR, LHR, and Connexin-37 genes which represent oocyte maturity and oocyte quality (caspase-3 and survivin) were analyzed post-warming. Protein total and specific proteins including FSHR, LHR, and Caspase-3 were also measured to comprehend the effect of vitrification.

This was an in-vitro experimental study conducted from Juli 2020–February 2022 in Morula IVF Jakarta Clinic. A total of 38 cumulus-granulosa cell samples from infertile women diagnosed with polycystic ovary syndrome (PCOS) were analyzed. Vitrification was commenced by exposing the cells sample to the equilibration medium containing 15% EG for 5 minutes followed by exposing the cells to vitrification medium (15% EG and 15% DMSO) for 30 seconds. Cell samples were subsequently immersed in liquid nitrogen (-196 0C) for 5 minutes. Warming procedure using sucrose solution (0.5 M, 0.25 M, 0.125 M) was performed consecutively. Real-time quantitative polymerase chain reaction (rt-qPCR) dan sandwich ELISA was utilized to measure relative expression and concentration of both total and specific protein. Data analysis was performed using T-independent or Mann-Whitney and Pfaffl formulation for fold-changes measurement.

This study found that concentration of both total (30 µg/mL vs. 12.5 µg/mL, p > 0.05) and specific proteins was similar between cumulus-granulosa cells of mature and immature oocytes (FSHR: 0.47 µg/mL vs. 0.48 µg/mL , LHR: 0.1 µg/mL vs. 0.09 µg/mL, and caspase-3: 0.51 µg/mL and 0.58 µg/mL, respectively, p > 0.05). Relative expression of maturity-associated genes such as BMP-15, LHR and connexin-37 post-warming did not significantly different in either cumulus-granulosa cells obtained from mature or immature oocytes (BMP-15: 1.6 vs. 1.4 fold, LHR: 2.3 vs. 2.3 fold, connexin-37: 0.9 vs. 0.9 fold, p > 0.05). However, we observed decreased relative expression of GDF-9 and FSHR post-warming in either cumulus-granulosa cells obtained from mature or immature oocytes (GDF-9: 0.2 vs 0.1 fold, and FSHR: 0.3 vs. 0.02 fold, p < 0.01, respectively). In protein level, concentration of FSHR, LHR, and caspase-3 as well as protein total post-warming did not significantly different than that of fresh condition (FSHR: 0.4 vs. 0.4 µg/mL and 0.4 vs. 0.5 µg/mL, LHR: 0.1 vs. 0.1 µg/mL dan 0.1 vs. 0.1 µg/mL, and caspase-3: 1.9 vs. 1.5 µg/mL and 1.7 vs. 1.6 µg/mL, repectively, p > 0,05).

This study concluded that vitrification is a safe procedure for fertility preservation which is able to preserve cumulus-granulosa cells viability as a representative of mature and immature oocytes survival post-warming."