Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Oyong Luffa acutangula L (Roxb)) merupakan buah dari salah satu kelas Cucurbitaceae yang dikonsumsi sebagai sayuran dan telah dimanfaatkan sebagai bahan dasar kosmetik karena memiliki aktivitas keratolitik. Berdasarkan  fakta tersebut, diduga terdapat kandungan protease pada buah oyong untuk dimurnikan dan dieksplorasi karakterisasinya. Untuk membuktikan terdapat kandungan protease pada buah oyong, dilakukan isolasi protease dengan cara fraksinasi menggunakan ammonium sulfat dan pemurnian menggunakan kromatografi pertukaran ion selulosa DEAE dan kromatografi filtrasi gel menggunakan sephadex G-100 dan G-75. Protease yang berhasil dimurnikan memiliki aktivitas spesifik yaitu 81,922 U/mg dengan berat molekul sebesar 34 kDa. Aktivitas protease buah oyong dapat diaktifkan secara optimal pada suhu 37°C, pH 7, dan dalam waktu 10 menit dan dapat dihambat oleh pemberian inhibitor PMSF dan senyawa oksidator H2O2. Hal ini yang menyatakan bahwa protease buah oyong ialah golongan protease serin dan memiliki gugus thiol di dalam struktur proteinnya. Kemampuan protease buah oyong dalam mencerna protein makanan dibuktikan melalui penurunan berat sampel seperti daging sapi dan putih telur rebus. Penurunan berat sampel juga dibandingkan dengan peningkatan pelepasan konsentrasi asam amino tirosin. Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa protease yang berhasil dimurnikan dari buah oyong ialah protease serin yang berpotensi digunakan sebagai terapi pengganti enzim pencernaan.

---

Courgette (Luffa acutangula L (Roxb)) is a one of Cucurbitaceae's fruit which is often consumed as a vegetable and has been used as a cosmetic ingredient because it has keratolytic activity. Based on these facts, it is thought that there are proteases in the courgette fruit to be purified and explored. To prove the protease content in courgette fruit, protease was isolated by fractionation using ammonium sulfate and purification using DEAE cellulose ion-exchange chromatography and gel filtration chromatography using Sephadex G-100 and G-75. The purified protease has a specific activity of 81,922 U/mg with a molecular weight of 34 kDa. The courgette protease activity can be activated optimally at 37°C, pH 7, and within 10 minutes and can be inhibited by PMSF and H2O2 as oxidizing agents. It is indicated that the courgette protease is a serine protease and has a thiol group in its protein structure. The protease ability of courgette protease in digesting food protein is proven by weight-reduced such as beef and boiled egg white. The weight-reduced was also compared with an increasing tyrosine release in the supernatant medium. From this study, it can be concluded that the protease that was successfully purified from courgette fruit is a serine protease that has the potential to be used as replacement therapy for digestive enzymes."

"Latar Belakang: Resistensi insulin pada jaringan otot skelet, hepar, dan adiposit merupakan penyebab utama terjadinya DM tipe 2 serta berbagai penyakit metabolik lain. Resistensi insulin masih sulit diatasi menggunakan obat yang tersedia, sehingga pencarian obat sensitisasi insulin, terutama pada jaringan otot skelet menjadi urgensi dalam riset obat antidiabetes. Salah satu tanaman obat yang berpotensi dikembangkan sebagai obat sensitisasi insulin adalah brotowali.Tujuan: Mengidentifikasi target terapi utama dari brotowali sebagai agen sensitisasi insulin melalui pendekatan in silico, menguji aktivitasnya secara in vitro pada kultur sel otot skelet L6.C11, dan mengidentifikasi senyawa aktifnya menggunakan metode LC-MS/MS metabolomik.Metode: Pencarian target terapi utama resistensi insulin yang ditarget oleh brotowali dilakukan melalui analisis jejaring farmakologi yang diikuti dengan simulasi penambatan molekuler dan dinamika molekuler. Kultur sel otot skelet L6.C11 digunakan sebagai model sel resisten insulin pasca-induksi tinggi glukosa dan tinggi insulin. Hasil fraksinasi terhadap ekstrak metanol brotowali (n=33) diuji aktivitasnya terhadap peningkatan kadar glikogen dan inhibisi fosforilasi serin-312 pada IRS1(metode enzime-linked immunosorbent assay), serta peningkatan GLUT4 tertranslokasi (metode konfokal-imunositokimia). Metode LC-MS/MS metabolomik digunakan untuk menganalisis metabolit dari fraksi-fraksi uji. Analisis statistik komparatif melalui uji ANOVA satu arah dan analisi multivariat melalui PCA dan OPLS untuk mengidentifikasi senyawa penanda bioaktif.Hasil: Analisis jejaring farmakologi memprediksi adanya tiga jalur terapi dari resistensi insulin yang ditarget oleh senyawa kandungan brotowali (jalur persinyalan PI3K, TNF, dan MAPK). Fosforilasi serin-312 pada IRS1 ditentukan menjadi target terapi dalam pengujian in vitro didasarkan pada perannya yang besar pada patogenensis resistensi insulin (degree: 12). Hasil uji in vitro mengidentifikasi fraksi 3 sebagai fraksi dengan aktivitas tertinggi dari seluruh fraksi uji (2,55+0,12 ?g/mL; 45,68+3,20%; 64,07+1,78 AU) dalam aktivitas peningkatan glikogen, inhibisi pIRS1 ser-312, dan peningkatan translokasi GLUT4. LC-MS/MS metabolomik mampu mengidentifikasi senyawa penanda bioaktif batang brotowali berupa tinoskorsida D, higenamin, dan tinoskorsida A.Kesimpulan: Analisis komputasi jejaring farmakologi mampu memprediksi dengan baik target terapi dan senyawa aktif brotowali. Secara in vitro, senyawa kandungan batang brotowali mampu meningkatkan sensitisasi insulin dengan senyawa penanda bioaktif berupa tinoskorsida D, higenamin, dan tinoskorsida A.

---

Background: Insulin resistance in skeletal muscle tissue, liver and adipocytes is the main cause of type 2 DM and various other metabolic diseases. Insulin resistance is still difficult to overcome using available drugs, so the search for insulin sensitizing drugs, especially in skeletal muscle tissue, is an urgency in antidiabetic drug research. One of the medicinal plants that has the potential to be developed as an insulin sensitizing drug is brotowali.

Objectives: To identify potential therapeutic targets of brotowali as an insulin sensitizing agent through an in silico approach, to test its in vitro activity in L6.C11 skeletal muscle cell culture, and to identify its active compounds using the LC-MS/MS method.

Methods: The search for the potential therapeutic target of insulin resistance targeted by brotowali was carried out through network pharmacology analysis followed by molecular docking and molecular dynamics simulations.

The fractionation of brotowali methanol extract (n=33) were tested for their activity on increasing glycogen levels and inhibition of serine-312 phosphorylation on IRS1 (enzyme-linked immunosorbent assay method), as well as increasing translocated GLUT4 (confocal-immunocytochemical method). The LC-MS/MS metabolomics method was used to analyze the metabolites of the tested fractions. Comparative statistical analysis through one way ANOVA test and multivariate analysis through PCA and OPLS to identify bioactive marker compounds.

Results: Network pharmacology analysis predicted three therapeutic pathways of insulin resistance targeted by brotowali’s compounds (PI3K, TNF, and MAPK signaling pathways) with the PI3K pathway as the main pathway. Sequentially the signaling pathway regulate the glucose homeostasis, anti-inflammation, and cell proliferation. Phosphorylation of serine-312 in IRS1 was determined to be a therapeutic target in in vitro testing based on its major role in the pathogenesis of insulin resistance (degree: 12). In vitro tests identified fraction 3 as the fraction with the highest activity of all tested fractions (2.55+0.12 µg/mL; 45.68+3.20%; 64.07+1.78 AU) in glycogen increasing activity , inhibition of pIRS1 ser-312, and increased GLUT4 translocation sequentially. The bioactive marker compounds of brotowali stems were identified as tinoscorside D, higenamin, and tinoscorside A.

Conclusion: Network pharmacology computation was successfully predict the therapeutic targets and active compounds of brotowali. At in vitro test, compounds contained in brotowali stems can increase insulin sensitization with bioactive markers were tinoscorsida D, higenamin, and tinoscorsida A."

"Tumbuhan Saurauia vulcani telah dimanfaatkan masyarakat di kawasan danau Toba, Sumatera Utara sebagai obat tradisional antidiabet dan penyakit pencernaan lainnya. Sementara itu, studi tentang senyawa aktif sebagai antikanker kolorektal belum pernah dilakukan. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi senyawa aktif Saurauia vulcani, melakukan pengujian antikanker kolorektal pada sel WiDr dan HCT 116 dan penentuan struktur senyawa bioaktif. Bahan baku penelitian ini adalah daun Saurauia vulcani yang diperoleh dari Sipiso-piso, Kabupaten Karo, Sumatera Utara. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi bertingkat menggunakan pelarut n-heksana, etil asetat dan metanol. Pengujian yang dilakukan meliputi uji fitokimia, toksisitas, total fenol dan uji antikanker (sitotoksik) dengan metode Methyl Thiazolyl Tetrazolium (MTT) pada sel kanker kolorektal WiDr dan HCT 116. Hasil penelitian menunjukkan bahwa rendemen fraksi n-heksana adalah 7,04 %, fraksi etil asetat 12,92% dan fraksi metanol 17,95%. Hasil penapisan fitokimia mengungkapkan adanya beberapa senyawa kimia tanin, saponin, flavonoid, dan terpenoid. Hasil uji toksisitas (LC50) pada fraksi n-heksana, etil asetat dan metanol berturut-turut adalah 365,19 ppm, 715,28 ppm dan 225,77 ppm. Semua kelompok fraksi yang diuji tergolong toksik karena kurang dari 1000 ppm. Kandungan total fenolik Saurauia vulcani adalah 7,16 mg GAE/g, 13,70 mg GAE/g dan 16,56 mg GAE/g untuk masing-masing fraksi n-heksana, etil asetat, dan metanol. Nilai total phenolic content (TPC) tertinggi adalah pada fraksi metanol. Aktivitas sitotoksik ekstrak dengan sel kanker WiDr menghasilkan bahwa fraksi etil asetat menunjukkan aktivitas sitotoksik yang kuat (97,41 µg/mL) terhadap sel kanker tersebut; sedangkan ekstrak metanol (191,92 µg/mL) dan ekstrak n-heksana (456,19 µg/mL) memberikan aktivitas sitotoksik sedang sampai agak lemah. Hal yang sama pada uji sitotoksik dengan sel HCT 116 menunjukkan bahwa ekstrak metanol (529,39 µg/mL), ekstrak etil asetat (568,53 µg/mL), dan n-heksana (777,35 µg/mL) tidak memberikan aktivitas sitotoksik. Hasil pemisahan dan pemurnian senyawa kimia dengan kromatografi berdasarkan metode bioassay guided isolation diperoleh 4 senyawa murni. Hasil elusidasi struktur kimia menggunakan spektrofotometer UV-Vis, spektroskopi massa, FTIR, H-NMR, C-NMR, DEPT, HMQC, COSY, HMBC, dan MS adalah senyawa avicularin, kuersitrin, hiperosida, dan rutin. Keempat senyawa ini, yang memiliki aktivitas antikanker dan yang terbaik adalah senyawa avicularin. Keempat senyawa ini baru pertama kali diisolasi dari tumbuhan Saurauia vulcani. Hasil pengujian dengan sel kanker WiDr menunjukkan bahwa avicularin (173,44 µg/mL) memiliki aktivitas yang paling kuat diikuti oleh hiperosida (379,57 µg/mL), rutin (521,14 µg/mL) dan kuersitrin (575,14 µg/mL).

---

Saurauia vulcani plant has been used traditionally by people in the Lake Toba area, North Sumatra as a traditional anti-diabetic medicine and other digestive diseases. Meanwhile, studies on active compounds such as colorectal anticancer have never been carried out. This study aims to isolate the active compound of Saurauia vulcani and perform colorectal anticancer testing on WiDr and HCT 116 cells and determination of the structure of the bioactive compound. The raw materials for this research were Saurauia vulcani leaves obtained from Sipiso-piso, Karo Regency, North Sumatra. Extraction was carried out by multilevel maceration method using n-hexane, ethyl acetate, and methanol as solvents. Testing performed included phytochemical, toxicity, total phenolic content and anticancer (cytotoxic) tests using the MTT method on WiDr and HCT 116 colorectal cancer cells. The results showed that the yield of the n-hexane fraction was 7.04%, the ethyl acetate fraction was 12.92 %, and the 17.95% methanol fraction. The result of the phytochemicals screening revealed the presence of several chemical compounds including tannins, saponins, flavonoids, and terpenoids. The results of the toxicity test (LC50) on the n-hexane, ethyl acetate, and methanol fractions were 365.19 ppm, 715.28, and 225.77 ppm respectively. All fraction groups tested were classified as toxic because it was less than 1000 ppm. The total phenolic content of Saurauia vulcani was 7.16 mg GAE/g, 13.70 mg GAE/g, and 16.56 mg GAE/g for the n-hexane, ethyl acetate, and methanol fractions, respectively. The highest total phenolic content (TPC) value was in the methanol fraction. The cytotoxic activity of the extract with WiDr cancer cells resulted in the ethyl acetate fraction showing strong cytotoxic activity (97.41 µg/mL) against these cancer cells; while methanol extract (191.92 µg/mL) and n-hexane extract (456.19 µg/mL) gave moderate to weak cytotoxic activity. The same thing happened in the cytotoxic test with HCT 116 cells showing that methanol extract (529.39 µg/mL), ethyl acetate extract (568.53 µg/mL), and n-hexane (777.35 µg/mL) did not show cytotoxic activity. The results of the separation and purification of chemical compounds by chromatography based on the bioassay-guided isolation method yielded 4 pure compounds. The results of chemical structure elucidation using a UV-Vis spectrophotometer, mass spectroscopy, FTIR, H-NMR, C-NMR, DEPT, HMQC, COSY, HMBC, and MS were avicularin, quercitrin, hyperoside, and rutin. These four compounds have anticancer activity and the best one is avicularin compound. These four compounds were isolated for the first time from the Saurauia vulcani plant. Testing results with WiDr cancer cells showed that avicularin (173.44 µg/mL) had the strongest activity followed by hyperoside (379.57 µg/mL), rutin (521.14 µg/mL), and quercitrin (575.14 µg /mL)."