Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"ABSTRAKLatar Belakang: Laki-laki menyumbang sekitar 40% kasus untuk infertilitas. Salah satu penyebab infertilitas yakni kasus azoospermia. Pada beberapa kasus azoospemia yang ditangani melalui teknologi reproduksi berbantu dengan kegagalan perolehan sperma dari testicular sperm extraction (TESE), maka Spermatogonial Stem Cells (SSCs) dapat menjadi salah satu alternatif terapi. SSCs dapat diperoleh dari isolasi dan kultur sel spermatogenik. Sejak abad ke 19, berbagai metode isolasi dan kultur sel spermatogenik mulai dikembangkan. Akan tetapi berbagai metode ini belum ada yang optimal. Oleh karena itu, dibutuhkan suatu teknik kultur untuk mengoptimalisasi proses ekspansi sel spermatogenik, dari segi faktor apoptosis.Metode: Pada penelitian ini dilakukan pemberian suplemen kultur berbeda pada medium kultur yakni FBS 10%, PRP 10%, dan PRP 10% ditambah faktor pertumbuhan (GDNF, bFGF, EGF) untuk proses kultur. Hasil kultur dilakukan identifikasi marka permukaan CD90 dan GFRA1 menggunkan flowsitometri dan dilakukan uji apoptosis. Fenomena apoptosis yang muncul diamati berdasar adanya fragmentasi pada DNA dengan metode TUNEL serta adanya peran eksekutor apoptosis yakni kaspase-3 yang teramati pada pengujian imunositokimia.Hasil Penelitian: Hasil analisis marka permukaan CD90 dan GFRA1 memiliki nilai berbeda- beda pada pemberian medium yang berbeda. Pertumbuhan sel kultur lebih baik dengan indeks apoptosis yang lebih rendah pada medium dengan pemberian PRP dan PRP ditambah faktor pertumbuhan (FBS= 25.01%, PRP = 9.99%, PRP+ GF= 2.47%). Nilai ekspresi kaspase-3 pada sel yang diberi suplemen FBS sekitar 21%, PRP 13% dan PRP + GF 7%.Kesimpulan: PRP lebih baik dibandingkan dengan FBS sebagai medium kultur sel spermatogenik, dari segi apoptosis.

---

ABSTRACTBackground: Males contribute to 40% of the infertility cases over the universe. One of the causes of men infertility is azoospermia. In some cases of azoospemia which are handled through assisted reproductive technology with the failure of sperm retrieval from testicular sperm extraction (TESE), the Spermatogonial Stem Cells (SSCs) could be an alternative therapy. SSCs can be obtained from isolation and culture of spermatogenic cells. Since the 19th century, various methods of isolation and spermatogenic cell culture began to be developed. However, there are not optimal condition of this yet. Therefore, we need to optimize the spermatogenic cell expansion method, particularly in apoptotic factor.Method: In this study, the culture system were administrated by thesupplementation with 10% FBS, 10% PRP, and 10% PRP plus growth factors (GDNF, bFGF, FGF). Spermatogenic cells were identified the surface markers CD90 and GFRA1 using flowsitometry and apoptosis tests were performed. The apoptotic phenomenon was observed based on the presence of DNA fragmentation by the TUNEL method and the caspase-3 expression by immunocytochemical.Result: The result of surface marker had different value. The results showed better that cell culture growth and lower apoptotic index in the medium with PRP and PRP+ GF (FBS= 25.01%, PRP= 9.99%, PRP+ GF= 2.47%). Immuno-expression of caspase-3 in cells cultured with FBS 21%, PRP 13%, dan PRP+ GF 7 %.Conclusion: PRP was better than FBS as the spermatogenic cell culture medium based on apoptotic phenomenon."

"Kuda laut (Hippocampus comes L.) telah digunakan sebagai Jamu di Indonesia yang diduga memiliki efek afrodisiak. Hal ini dilaporkan dalam studi ekstrak kuda laut (EKL) dapat meningkatkan sel spermatogonia, spermatosit, spermatid dan sel Leydig pada mencit. Penggunaan Depo-medroksiprogesteron asetat (DMPA) dapat menginhibisi poros hipotalamus-hipofisis-testis dalam menurukan testosteron selama 12 minggu. Hal ini menyebabkan spermatogenesis terganggu dan apoptosis sel spermatogenik meningkat. Kemampuan EKL saat ini belum banyak diteliti terkait pengaruhnya pada kajian histologi testikuler terutama populasi sel-sel spermatogenik dan sel Leydig serta apoptosis sel setelah induksi DMPA. Tiga puluh tikus jantan SD diinduksi DMPA 1,25 mg/kgBB pada minggu ke-0 dan 12, kemudian dikelompokkan akuades (K1), CMC 1% (K2), dosis ekstrak 150 mg/kgBB (K3), 225 mg/kgBB (K4) dan 300 mg/kgBB (K5) yang di cekok minggu ke-7 sampai ke-18. Selanjutnya testis diisolasi dan dilakukan pembuatan preparat hematoxylin and eosin (H&E) dan immunohistokimia (IHK) ekspresi Fas L. Sel-sel dihitung manual pada mikroskop dan menentukan IHK-skor. Analisis data dengan uji ANOVA dan Kruskall-Wallis. Dosis EKL 150 dan 225 mg/kgBB secara bermakna (p<0,05) meningkatkan populasi sel-sel spermatogenik dan sel Leydig serta menurunkan apoptosis sel dalam ekspresi Fas L selama 18 minggu sehingga dosis tersebut berpotensi dalam meningkatkan fungsi testikuler reproduksi tikus jantan setelah induksi DMPA.

---

The seahorse (Hippocampus comes L.) had been used as ‘Jammu’ which probably have powerful aphrodisiac pharmacological activities. Depot-medroxyprogesterone acetate (DMPA) is a contraceptive drug that can inhibit the hypothalamic-pituitary-testis axis to reduce testosterone levels and could increase cell apoptosis for 12 weeks. In addition to improving testosterone levels, studies in mice reported that seahorse extract (SE) could increase spermatogonia, spermatocytes, spermatids, and Leydig cells, but limited studies are reporting the effects of SE in that population and apoptosis of cells in DMPA induced rats. Thirty male SD rats were induced with DMPA 1,25 mg/kgBW at weeks 0 and 12. Animals were randomly grouped by: aquadest (G1), CMC 1% (G2), SE dose 150 mg/kg BW (G3), SE dose 225 mg/kg bb (G4), SE 300 mg/kg BW (G5), gavage every day at 7-18 weeks. After that, the testis was obtained, and the tissue slide was processed with hematoxylin and eosin (H&E) and observed by immunohistochemistry. Data was collected by manually counting cells and determining H-score and analysed using one-way ANOVA and Kruskall-Wallis test. The reported dose of SE 150 and 225 mg/kg BW significantly increase spermatogenic cells and Leydig cells population also decrease cell apoptosis of Fas L expression, by means potentially increased testicular function in rats after DMPA induction.

 

"