Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Pemuliaan galur Aspergillus melalui cara perbaikan genetik klasik atau molekuler modern biasa dilakukan untuk meningkatkan metabolit sekunder yang dihasilkan. Transformasi genetik kapang sebagian besar bergantung pada persiapan protoplas yang baik, meskipun ada beberapa metode transformasi alternatif yang tidak memerlukan preparasi protoplas. Pada review ini akan dirangkum aplikasi protoplas dan preparasinya dalam metode pemuliaan galur dari berbagai spesies Aspergillus. Beberapa aplikasi dari teknik protoplasting yang telah digunakan untuk melakukan pemuliaan galur pada Aspergillus sp., adalah Protoplast-mediated transformation (PMT), fusi protoplas, UV mutagenesis dengan preparasi protoplas dan Agrobacterium-mediated transformation (AMT). Beberapa sumber enzim potensial juga dibahas pada review ini. PMT adalah metode yang paling umum dan diketahui telah efektif digunakan, namun prosedurnya cenderung rumit dan memiliki tingkat regenerasi yang rendah. Banyak faktor yang berperan dalam peningkatan strain jamur dengan metode protoplasting untuk meningkatkan produk-produk bioteknologi salah satunya adalah pemilihan kombinasi enzim yang optimal untuk melisiskan dinding sel Aspergillus. Crude enzyme dari saluran pencernaan bekicot (Achatina fulica) adalah salah satu alternatif enzim dari alam yang diduga dapat digunakan untuk meningkatkan nilai ekonomis pembentukan protoplas.

---

Aspergillus strain improvement through classical or modern molecular genetic improvement is usually done to increase fungal secondary metabolites production. The fungal genetic transformation largely depends on preparation of fungal protoplasts, although there are several alternative transformation methods that do not require protoplast preparation. This review will summarize the application of protoplast and its preparation in the strain improvement method of various Aspergillus species. Some applications of the protoplast isolation which have been used in strain improvement of Aspergillus sp. are Protoplast-mediated transformation (PMT), protoplast fusion, UV mutagenesis with protoplast preparation and Agrobacterium-mediated transformation (AMT). Several potential enzyme sources are also discussed in this review. PMT is the most common method and known that it has been effectively used, but the procedure tends to be complicated and have a low regeneration rate. Many factors play a role in improving fungal strains to increase biotechnological products by the protoplast isolation, one of which is the selection of an optimal enzyme combination to lyse the Aspergillus cell wall. Crude enzyme from gut juice of African Giant snail (Achatina fulica) is an alternative nature enzyme that could be able to be used to increase the economics value of protoplast formation."

"Lovastatin adalah produk metabolit sekunder yang dihasilkan oleh Aspergillus terreus dan mempunyai aktivitas sebagai inhibitor enzim hidroksi metil glutaril koenzim A (HMG-KoA) reduktase. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui perbandingan kadar lovastatin yang dihasilkan oleh A. terreus BSC1 isolat lokal dan A. terreus F2 hasil fusi protoplas. Fermentasi dilakukan dengan metode kultur kocok menggunakan media Albert, media Martius, media Martius dengan minyak kedelai dan minyak sawit. Analisis kaldu fermentasi menggunakan KCKT dengan fase gerak asetonitril : asam fosfat 0,1% (65:35 v/v), fase diam supercosil LC-18 dan detektor spektrofotometer UV-Vis pada  235 nm. Konsentrasi lovastatin tertinggi isolat lokal A.terreus BSC1 sebesar 1094,27 ppm diperoleh menggunakan media Martius dengan minyak kedelai, sedangkan konsentrasi lovastatin tertinggi fusan A. terreus F2 sebesar 1003 ppm diperoleh dengan menggunakan media Albert.

---

Lovastatin is a secondary metabolite produced by Aspergillus terreus. Lovastatin is an inhibitor of hydroxyl methyl glutaryl coenzyme A (HMG-CoA) reductase. The objective of this study were to recognize the comparition concentration between lovastatin produced by A. terreus the local isolate and A. terreus produced by protoplast fusion. Shake flask fermentation was carried out a rotary shaker using an Albert medium, a Martius medium, a Martius medium with soybean oil and palm oil. Lovastatin in fermentation broths was determined by HPLC using a Supercosil LC-18 column with an eluen comprising acetonitrile : 0,1% aqueous phosphoric acid (65:35 v/v) with the flow rate was 1,5 mL/min. The absorbtion was measured at a wavelength of 254 nm. The highest lovastatin concentration from isolate local A. terreus BSC1 was 1094,27 ppm using a Martius medium with soybean oil. The highest lovastatin concentration from fusan A. terreus F2 was 1003 ppm using an medium Albert."

"The purposes of this study was to identify the optimum concentration of the lytic enzyme Glucanex for protoplastisolation and to conduct fusion for the purpose of increasing inulinase production. The study performs the protoplastfusion technique using Pichia manshurica and Rhodosporidium paludigenum. Protoplast fusion consists of a series ofstages: protoplast isolation, protoplast fusion, protoplast regeneration, and analysis of hybrid fusion results. Protoplastisolation and fusion success rate are determined by various factors, including age of the culture, media type, and type oflytic enzymes used. Hybrid results were analyzed using a fungicide as a marker and measuring specific growth rate (μ)of the hybrid compared with parental growth rates. Results demonstrated that a concentration of 4 mg/mL of Glucanexproduces the greatest number of protoplasts, 7.2 x 1010 (cell/mL) for P. manshurica and 8.8 x 1010 (cell/mL) for Rh.paludigenum. The results of analysis of hybrid fusions indicate that the study has identified a new fusant, called fusantF4. Fusant F4 is capable of producing the highest inulinase, 0.6892 IU, compared with parentals P. manshurica, 0557IU, and Rh. paludigenum, 0.3263 IU. Fusant F4 has specific growth rate (μ) of 0.3360/h and generation time (g) of2.0629 h.Fusi Protoplas Intergenus antara P. manshurica dan Rh. paludigenum untuk Meningkatkan Produksi Inulinase.Teknik fusi protoplas yang dilakukan pada penelitian ini secara intergenus yaitu antara Pichia manshurica danRhodotorula paludigenum. Fusi protoplas dilakukan melalui serangkaian tahapan yaitu: isolasi protoplas, proses fusiprotoplas, regenerasi protoplas dan analisis hibrid (fusant) hasil fusi. Tingkat keberhasilan isolasi dan fusi protoplassangat ditentukan oleh berbagai faktor, diantaranya umur biakan, jenis medium, enzim litik, dan jenis fusogen yangdipergunakan. Hasil hibrid (fusant) yang diperoleh selanjutnya dianalisis dengan menggunakan fungisida sebagaimarker dan kecepatan pertumbuhan spesifik (μ) hibrid (fusant) dibandingkan dengan parental. Tujuan penelitian adalahuntuk memperoleh konsentrasi enzim Glucanex yang optimum untuk mengisolasi protoplas, dan untuk memperolehfusant yang mampu menghasilkan inulinase tinggi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi enzim litikGlucanex 4 mg/mL mampu menghasilkan protoplas terbaik, sebesar 7,2 x 1010 (sel/mL) untuk P. manshurica dan 8,8 x1010 (sel/mL) untuk Rh. paludigenum. Hasil analisis hibrid (fusant) menunjukkan bahwa pada peneltiian ini berhasildiperoleh fusant baru, yaitu fusant F4. Fusant F4 mampu menghasilkan inulinase lebih tinggi 0,6892 IU, lebih baikdibandingkan dengan parental P. manshurica 0,557 IU, dan Rh. paludigenum 0,3263 IU, memiliki kecepatanpertumbuhan spesifik (μ) sebesar 0,3360/jam, dan waktu generasi (g) 2,0629 jam."