Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Latar belakang: Saat ini prevalens alergi semakin meningkat. Terapi alergi lebih terfokus untuk mengatasi gejala simptomatik. Pendekatan lain adalah terapi imunomodulasi dengan agonis toll like receptor (TLR) 9 yang dapat mengalihkan respon imun sel TCD4+ Th2 ke arah Th1. CpG ODN 2006x3_PD adalah oligonukleotida sintetik kelas B merupakan agonis TLR9 yang berpotensi aman karena mengandung fosfodiester. Pada penelitian ini CpG ODN 2006x3_PD diuji kemampuan untuk mengatasi alergi dengan menggunakan penghantar nanopartikel kitosan, melalui uji in vitro pada sel mononukleus darah tepi dan in vivo pada hewan coba mencit alergi. Metode: Preparasi nanopartikel kitosan dilakukan dengan metode gelasi ion, melalui reaksi ikat silang kitosan dan tripolifosfat. Nanopartikel dikarakterisasi dengan Dynamic light scattering (DLS), zeta sizer dan transmission electron microscope (TEM). Uji pengikatan dilakukan dengan elektroforesis pada gel agarosa 12%, uji toksisitas dan kemampuan aktivasi NF-κB dilakukan pada sel RAW Blue, dengan menggunakan cel counting kit 8 dan kit Quanti blue. Sel mononukleus darah tepi yang distimulasi selama 7 hari pada uji in vitro dan plasma hewan coba mencit Balb/c pada uji in vivo diukur konsentrasi IFNγ, IL-10, IL-13 dan IgE dengan metode ELISA. Hasil: Diperoleh nanopartikel dengan ukuran <300 nm, muatan permukaan positif, bentuk sferis, tidak toksik dan dapat mengaktivasi NF-κB. Uji in vitro pada sel mononukleus darah tepi menunjukkan CpG ODN 2006x3_PD yang dihantarkan nanopartikel kitosan dapat menstimulasi sitokin tipe Th1 IFNγ dan T reg IL-10, menurunkan sitokin tipe Th2 IL-13 namun belum dapat menurunkan secara bermakna produksi IgE total pada sel mononukleus darah tepi individu sehat dan alergi Aplikasi intra nasal 10 ug/kali, 3 kali seminggu selama 3 minggu CpG ODN 2006x3_PD dan CpG ODN 2006x3_PD yang dihantarkan nanopartikel kitosan pada mencit Balb/c yang diinduksi alergi dengan ovalbumin dapat menstimulasi sitokin tipe Th1 IFNγ dan Treg IL-10, namun belum dapat menurunkan secara bermakna sitokin tipe Th2 IL-13 pada plasma mencit. Aplikasi CpG ODN 2006x3_PD dapat menurunkan produksi IgE spesifik anti ovalbumin pada plasma mencit meskipun belum dapat menurunkan produksi IgE total. Simpulan: CpG ODN 2006x_PD dapat menjadi kandidat imunostimulator yang potensial pada alergi.

---

Background: Currently, prevalence of allergy has increased in worldwide. Allergy treatment is mainly focused to reduce clinical symptoms. Another approach is immunomodulation therapy which utilizes toll like receptor (TLR) 9 agonist that may redirect pro-allergenic Th2 biased CD4+ T cell response toward Th1. CpG ODN 2006x3_PD which is classified as synthetic oligonucleotides B has potential as a safe TLR9 agonist due to its natural backbone. In this study, CpG ODN 2006x3_PD was examined about its ability in overcoming allergies by using chitosan nanoparticles delivery, through in vitro tests on peripheral blood mononuclear cells and in vivo through allergic mice animal model. Methods: Chitosan nanoparticles was prepared by ionic gelation method, through crosslinking reaction of chitosan and tripolyphosphate. Nanoparticles are characterized by Dynamic light scattering (DLS), zeta sizer and transmission electron microscope (TEM). The binding test was carried out with electrophoresis on 12% agarose gel, toxicity test and NF-κB activation ability performed on RAW Blue cells, using cel counting kit 8 and Quanti blue kit. IFNγ, IL-10, IL-13 and IgE level of in vitro tests of peripheral blood mononuclear cells after 7 days stimulation and Balb/c mice plasma of in vivo study were measured by ELISA method.Results: Less than 300 nm, positive surface charge, spherical shape and nontoxic chitosan nanoparticles were obtained. These nanoparticles could deliver CpG ODN to activate NF-κB of mouse RAW-Blue cells effectively. In vitro assays of peripheral blood mononuclear cells showed that CpG ODN 2006x3_PD delivered by chitosan nanoparticles may stimulate Th1 IFNγ and T reg type cytokines IL-10, also decrease the Th2-type cytokine IL-13 but it couldn't inhibit total IgE production in peripheral blood mononuclear cells significantly. Intranasal application of 10 ug, 3 times per week for 3 weeks of CpG ODN 2006x3_PD and CpG ODN 2006x3_PD which were delivered by chitosan nanoparticles in allergen induced Balb/c mice could stimulate Th1 IFNγ and Treg type cytokines IL-10, but it couldn't significantly reduce the Th2-type cytokine IL-13 in mice plasma . The CpG ODN application decreased the specific IgE production of anti ovalbumin in mice plasma although it couldn't significantly reduce total IgE production. Conclusions: CpG ODN 2006x_PD could be a potential candidate for allergic immunostimulator."

"Latar belakang: Imunoterapi merupakan salah satu terapi alergi melalui modulasi sistem imun. CpG ODN adalah agonis TLR9 yang digunakan untuk imunoterapi. CpG ODN mendorong peralihan respon imun dari tipe Th2 ke tipe Th1. Karena CpG ODN bermuatan negatif, maka diperlukan suatu sistem penghantaran untuk meningkatkan efikasinya. Nanopartikel kitosan banyak digunakan sebagai sistem penghantaran obat yang memiliki target mukosa. Penelitian ini bertujuan menganalisis profil IFN-γ, IL-10, IL-13 dan IgE anti ovalbumin pada limpa mencit alergi ovalbumin setelah pemberian CpG ODN terangkai nanopartikel kitosan secara intranasal. Dalam penelitian ini juga dilakukan uji korelasi antara IFN-γ dan IL-13. Metode: 25 ekor mencit Balb/c dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kelompok kontrol sehat, kontrol alergi, terapi CpG ODN nanopartikel kitosan, terapi CpG ODN, terapi nanopartikel kitosan. Mencit Balb/c diinduksi alergi dengan ovalbumin 10 ug pada hari ke-0 dan ke-7, sedangkan kontrol sehat diberikan PBS kemudian dilanjutkan dengan stimulasi pada hari ke-21, 22, 23 serial selama 3 minggu secara intranasal. Terapi CpG ODN nanopartikel kitosan 10 ug, CpG ODN 10 ug dan nanopartikel kitosan diberikan 1 jam setelah stimulasi ovalbumin intranasal. Konsentrasi IFN-γ, IL-10, IL-13, dan IgE anti ovalbumin diukur dengan metode sandwich ELISA. Analisis statistik menggunakan uji ANOVA yang dilanjutkan dengan post hoc LSD untuk data normal dan homogen, sedangkan uji Kruskal-Wallis yang dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney untuk data tidak normal dan tidak homogen. Korelasi antara IFN-γ dan IL-13 diuji dengan uji Spearman.Hasil: Konsentrasi IFN-γ dan IL-10 pada kelompok CpG ODN nanopartikel kitosan menunjukkan hasil lebih tinggi dibandingkan kelompok kontrol alergi, namun tidak terdapat perbedaan bermakna (p>0,05), sedangkan konsentrasi IL-13 dan IgE anti ovalbumin menunjukkan hasil lebih rendah pada kelompok CpG ODN nanopartikel kitosan dibanding kelompok kontrol alergi pada limpa mencit alergi kelompok terapi CpG ODN terangkai nanopartikel kitosan, namun tidak terdapat perbedaan yang bermakna (p> 0,05). Konsentrasi IFN-γ dan IL-10 pada kelompok CpG ODN nanopartikel kitosan terlihat lebih tinggi dibandingkan kelompok CpG ODN dan kelompok nanopartikel kitosan dan sebaliknya pada konsentrasi IL-13, namun secara statistik tidak terdapat perbedaan bermakna (p>0,05). Konsentrasi IgE anti ovalbumin pada kelompok CPG ODN nanopartikel kitosan lebih tinggi dibandingkan kelompok CpG ODN dan nanopatikel kitosan. Tidak terdapat korelasi antara IFN-γ dan IL-13 (p> 0,05, r=0,074).Simpulan: CpG ODN terangkai nanopartikel kitosan cenderung menstimulasi peningkatan IFN-γ dan IL-10 serta penurunan produksi IL-13 dan IgE anti ovalbumin pada limpa mencit alergi.

---

Background: Immunotherapy is an allergy therapy through modulation of the immune system. CpG ODN is a TLR9 agonist used for immunotherapy. CpG ODN promotes a shift in the immune response from the Th2 type to the Th1 type. Because CpG ODN is negatively charged, a delivery system is needed to increase its efficacy. Chitosan nanoparticles are widely used as a drug delivery system that targets mucosa. This study aimed to analyse the profile of IFN-γ, IL-10, IL-13 and IgE anti ovalbumin in the spleens of ovalbumin allergic mice after intranasal administered chitosan nanoparticles CpG ODN. This study also examined the correlation between IFN-γ and IL-13.

Methods: 25 Balb/c mice were divided into 5 groups: healthy control group, allergy control group, chitosan nanoparticle CpG ODN therapy, CpG ODN therapy, chitosan nanoparticle therapy. Balb/c mice were allergy-induced with ovalbumin 10 μg on day 0 and 7, while healthy control groups were given PBS then continued with stimulation on days 21, 22, 23 serial for 3 weeks intranasally. Therapy of 10 ug chitosan nanoparticles CpG ODN, 10 ug CpG ODN and chitosan nanoparticles were given 1 hour after intranasal ovalbumin stimulation. The concentrations of IFN-γ, IL-10, IL-13, and anti-ovalbumin IgE were measured by the sandwich ELISA method. Statistical analysis used the ANOVA test followed by post hoc LSD for normal and homogeneous data. The Kruskal-Wallis test followed by the Mann-Whitney test for abnormal and homogeneous data. The correlation between IFN-γ and IL-13 was used by the Spearman test.

Results: The IFN-γ and IL-10 concentrations in the CpG ODN chitosan nanoparticle group showed higher results than the allergy control group, but there was no significant difference (p> 0.05), while the IL-13 and anti ovalbumin IgE concentrations showed lower results in the CpG ODN chitosan nanoparticles group compared to the allergy control group in the allergic spleen of the allergic mice in the CpG ODN therapy group with chitosan nanoparticles, but there was no significant difference (p> 0.05). The IFN-γ and IL-10 concentrations in the CpG ODN group of chitosan nanoparticles were higher than the CpG ODN group and the chitosan nanoparticle group and vice versa at the IL-13 concentration, but statistically there was no significant difference (p> 0.05). The anti ovalbumin IgE concentration in the CpG ODN group of chitosan nanoparticles was higher than the CpG ODN and chitosan nanoparticle groups. There was no correlation between IFN-γ and IL-13 (p> 0.05, r = 0.074).

Conclusion: The CpG ODN chitosan nanoparticle sequences tended to stimulate the increase of IFN-γ and IL-10 and decreased the production of IL-13 and IgE anti ovalbumin in the spleen of allergic mice."