Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"The purpose of this study was to get optimum medium composition and agitation to trypsin-like protease production byLactobacillus plantarum FNCC 0270. The medium composition and agitation for enzyme production was optimized usingCentral Composite Design and Response Surface Method with Design Expert software version 7.1.5. Fermentation wascarried out in erlenmeyer flask at initial pH 8, 37 °C, with shaker incubator at 87.5 rpm. The results of the best of enzymeactivity 1.0 mU/mL, protein levels of 0.557 mg/mL and desirability value of 0.740. Numerical optimization was performedto approach the ideal state of the fermentation or desirability value of 1. The medium composition of fermentation usedwas: 3.64% baker's yeast, 1.21% glucose, and 0.13% skim milk. The enzyme activity reached was 1.51 mU/mL andprotein levels of 0.205 mg/mL. After numerical optimization, the fermentation process was verified using 125 mLErlenmeyer in shaking incubator at 77 rpm, initial pH 8, 37 °C, 15 h of fermentation. The verification results showed thatthe enzyme activity and protein levels was 1.273 ± 0.227 mU/mL and 0.248 ± 0.012 mg/mL, respectively.Optimization of Trypsin-like Protease Production by Lactobacillus plantarum FNCC 0270 using Response SurfaceMethodology. Tujuan penelitian ini adalah memperoleh komposisi medium dan agitasi optimum untuk produksi proteaseserupa tripsin oleh Lactobacillus plantarum FNCC 0270. Protease serupa tripsin (PST) dihasilkan oleh L. plantarumFNCC 0270 melalui proses fermentasi dengan optimasi komposisi medium dan agitasi menggunakan Central CompositeDesign dan Response Surface Methode, dengan software Design Expert versi 7.1.5. Fermentasi dilakukan dalamerlenmeyer pH awal 8 dan suhu 37 °C menggunakan shaker inkubator pada 87,5 rpm. Hasil eksperimen terbaikmenunjukkan aktivitas enzim 1 mU/mL, kadar protein 0.557 mg/mL dan diperoleh nilai desirability 0,740. Untukmendekati keadaan ideal atau nilai desirability 1 dilakukan optimasi melalui simulasi numerik, yaitu fermentasi dengankomposisi baker yeast 3,64%, kadar glukosa 1,21%, konsentrasi skim milk 0,13%, dan agitasi 77 rpm, sehingga diperolehaktivitas enzim 1,51 mU/mL dan kadar protein 0,205 mg/mL. Setelah optimasi numerik kemudian dilakukan verifikasifermentasi di laboratorium, dalam erlenmeyer menggunakan shaker inkubator, agitasi 77 rpm, pH awal 8, suhu 37 °C,selama 15 jam. Hasil verifikasi menunjukkan aktivitas enzim dan kadar protein masing-masing 1,273 ± 0,227 mU/mL dan0,248 ± 0,012 mg/mL."

"Salah satu kegunaan enzim tripsin adalah berperan dalam pemecahan rantai peptida pada protein menjadi asam amino yang diperlukan tubuh. Protease serupa tripsin (PST) dihasilkan oleh L. plantarum FNCC 0270 melalui proses fermentasi dengan optimasi komposisi media dan agitasi menggunakan Central Composite Design dan Response Surface Methode dengan software Design Expert versi 7.1.5. Untuk mendekati keadaan ideal dilakukan optimasi melalui simulasi numerik yaitu fermentasi dengan komposisi baker yeast = 3,64%, kadar glukosa = 1,21%, konsentrasi susu skim = 0,13% dan agitasi 77 rpm, waktu 15 jam akan diperoleh aktivitas enzim 1,51 mU/mL dan kadar protein 0,205 mg/mL. Dari optimasi numerik kemudian dilakukan verifikasi fermentasi di laboratorium, dalam erlenmeyer menggunakan shaker inkubator, agitasi 77 rpm, pH awal 8, suhu 370C, t=15 jam. Hasil verifikasi menunjukkan aktivitas enzim dan kadar protein masing-masing 1,273 ± 0,227 mU/mL dan 0,248 ± 0,012 mg/mL. Selanjutnya untuk isolasi PST dalam skala lebih besar dilakukan di dalam Fermentor volume kerja 3,5 liter, pada T=370C, pH = 8 aerasi 0,5 vvm, memberikan aktivitas 1,29 mU/mL, kadar protein 0,49 mg/mL. Pemurnian PST dilakukan dengan ultrafiltrasi Hollow Fiber Catridge 5 kD, pengendapan ammonium sulfat jenuh (30-70%), dialisis, kolom kromatografi penukar ion resin Q-XL 1 mL, (Ø1 cm x 2,5 cm); dan kolom kromatografi afinitas HiTrap Benzamidine FF 1mL, (Ø1 cm x 2,5 cm); ligand paminobenzamidine masing-masing memberikan peningkatan kemurnian terhadap enzim kasar. Dari SDS-PAGE diperoleh 4 pita yang setara dengan berat molekul 47 kD, 38 kD, 21 kD dan 13 kD. Enzim stabil pada pH 8 dan rentang suhu 25-35OC, hal tersebut dibuktikan waktu paruh enzim yang sama pada suhu 25, 30 dan 35OC, yaitu 693,2 menit. Nilai Km 0,231mM dan Vmaks 1,05mU/mL.menit menggunakan subtrat BAPNA. PST dihambat EDTA, Ca2+, Zn2+, Mg2+, Mn2+ dan oleh substrat?substrat spesifik (SBTI, FBS dan diazinon). Uji imunokimia PST dengan metode dot blot positip. Analisis protein melalui situs internet dari NCBI www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/ diperoleh struktur dari serine protease HtrA (L. plantarum subs.plantarum ST-III) terdiri dari tiga domain : 1. N-terminal : dari AA nomor 1-27 dan 28-131; 2. Domain aktif : dari AA nomor 132 s/d nomor 269; 3. PDZ_serine_protease : pada C-terminal mulai dari AA 311-406. Dengan soft ware Clone Manager® melalui align two sequens diperoleh 11 (sebelas) Lactobacillus penghasil trypsin-like serine protease yang mempunyai tingkat similaritas 40-90 %. Dengan soft ware Clustal W2 melalui multiple sequens alignment dari 11 (sebelas) Lactobacillus tersebut diperoleh pohon filogenetik yang menunjukkan L.plantarum mempunyai kedekatan kekerabatan dengan L.buchneri, L. brevis dan L.malefermentans. Hasil analisis kesejajaran menunjukkan bahwa 8 fragmen peptida dari pita 1 dan pita 2 hasil SDS-PAGE, berada pada region active domain keempat Lactobacillus penghasil trypsin?like serine protease. Berdasarkan hasil analisis kesejajaran tersebut diasumsikan bahwa protein PST dari L.plantarum FNCC 0270 termasuk kelompok protease serin dari L. plantarum.

---

One of the enzyme trypsin function is to split peptide chains of the protein into amino acids that the body needs. Trypsin like protease ( PST ) produced by L. plantarum FNCC 0270 which was isolated from fermented Growol. The medium compotion and agitation for enzyme production was optimized using Central Composite Design and Response Surface Method with Design Expert software version 7.1.5. Numerical optimization was performed to approach the ideal state of the fermentation.The medium composition of fermentation used was: 3.64 % baker's yeast, 1.21 % glucose, 0.13 % skim milk and agitation speed of 77 rpm. After 15 hours of fermentation the enzyme activity reached was1.51 mU/mL and protein levels of 0.205 mg/mL. After numerical optimization, the fermentation process was verified using 125 mL Erlenmeyer in shaking incubator 77 rpm agitation, initial pH 8, temperature of 370C, 15 hours of fermentation. The verification results showed that the enzyme activity and protein levels, was 1.273 ± 0.227 mU/mL and 0.248 ± 0.012 mg/mL, respectively. Furthermore PST isolation was done in the fermentor working volume of 3.5 liters, at T=370C, pH=8, aeration 0.5vvm, resulted in enzyme of 1.29 mU/mL, 0.49 mg protein/mL. PST purification performed with ultrafiltration Hollow Fiber Cartridge 5 kD, saturated ammonium sulfate precipitation ( 30-70 % ), dialysis, ion exchange chromatography column with resin Q-XL 1mL, (Ø1 cm x 2,5 cm) and HiTrap affinity chromatography column Benzamidine FF 1mL, (Ø1 cm x 2,5 cm); ligand p - aminobenzamidine each purification step increased purity of the crude enzyme. SDS - PAGE analysis showed 4 protein bands with molecular weight of 47 kD , 38 kD , 21 kD and 13 kD . The enzyme was stable at 8 pH and temperature range of 25 ? 350C. The half-life of the enzyme at 25, 30 and 35OC, was the same which was 693.2 minutes. Km value of 0.231 mM and Vmax of 1.05 mU/mL.min. Using BAPNA as a substrate. PST was inhibited by EDTA, Ca2+, Zn 2 +, Mg 2 +, Mn 2 + and by specific substrates ( SBTI, FBS and diazinon ). Trypsinlike protease affinity test with dot blot was positive. Based on www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/ structures of serine protease HtrA ( subs.plantarum L. plantarum ST - III ) consisted of three domains : 1. N - terminal : AA number from 1-27 and 28-131 ; 2. Active domain : AA number of 132 to 269 numbers ; 3. PDZ_serine_protease : the C-terminal ranging from AA 311-406. Using Clone Manager® soft ware through align two sequences obtained 11 ( eleven ) The trypsin - like serine protease producing Lactobacillus that has 40-90 % similarity level. Using the Clustal W2 soft ware through multiple sequences alignment of 11 (eleven) the phylogenetic tree of the isolate L.plantarum was closely realted to L.buchneri, L.brevis and L.malefermentans. Alignment analysis results showed that 8 peptide fragments of bands 1 and bands 2 of the SDS-PAGE was, in the region active domain of fourth trypsin - like serine protease -producing Lactobacilli."

"Adipic acid production through catalytic conversion of cyclohexanol-cyclohexanone using polyoxometalate H5[a-BW12O40] and H4[a-SiW12O40] as catalysts was carried out systematically. Polyoxometalates H5[a-BW12O40] and H4[a-SiW12O40] were synthesized using an inorganic synthesis method and were characterized using Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR). Adipic acid was formed from conversion of cyclohexanol-cyclohexanone and was characterized by using melting point measurement, identification of functional group using FTIR spectrophotometer, analysis of gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS), and 1H and 13C NMR (nuclear magnetic resonance) spectrophotometer. This research investigated the influence of reaction time and temperature on conversion. The results showed that adipic acid was formed successfully with a yield of 68% by using H5[a-BW12O40] as catalyst at the melting point of 150-152 °C after optimization. In contrast, using H4[a-SiW12O40] as catalyst, formation of adipic acid was only 3.7%. Investigation of time and temperature showed 9 h as the optimum reaction time and 90 °C as the optimum temperature for conversion of up to 68% adipic acid. Identification using FTIR, 1H, and 13C NMR showed that the adipic acid from conversion of cyclohexanol-cyclohexanone was in agreement with the standard adipic acid data in the literatures. GC-MS analysis indicated that several by-products were formed in conversion of cyclohexanol-cyclohexanone using H5[a-BW12O40] and H4[a-SiW12O40] as catalysts.

---

Produksi Asam Adipat dari Campuran Sikloheksanol-Sikloheksanon menggunakan Katalis Senyawa Polioksometalat. Produksi asam adipat melalui reaksi konversi katalitik sikloheksanol-sikloheksanon menggunakan senyawa polioksometalat H5[a-BW12O40] dan H4[a-SiW12O40] sebagai katalis telah dilakukan secara sistematis. Polioksometalat H5[a-BW12O40] dan H4[a-SiW12O40] disintesis menggunakan metoda sintesis anorganik dan dikarakterisasi menggunakan spektroskopi FTIR. Asam adipat yang terbentuk dari hasil konversi sikloheksanol-sikloheksanon dikarakterisasi melalui penentuan titik leleh, analisis gugus fungsional menggunakan spektrofotometer FTIR, analisis GC-MS dan analisis menggunakan spektrometer 1H dan 13C NMR. Pengaruh waktu reaksi dan temperatur reaksi pada proses konversi dipelajari pada penelitian ini. Hasil penelitian menunjukkan bahwa asam adipat berhasil terbentuk dengan rendemen sebesar 68% menggunakan H5[a-BW12O40] sebagai katalis dengan titik leleh sebesar 150-152 °C hasil optimasi. Pada sisi lain, pembentukan asam adipat hanya menghasilkan rendemen 3,7% menggunakan katalis H4[a-SiW12O40]. Pengamatan lebih lanjut melalui optimasi terhadap proses konversi sikloheksanol-sikloheksanon menjadi asam adipat menghasilkan waktu optimum reaksi 9 jam dan temperatur reaksi 90 °C menghasilkan asam adipat dengan rendemen sebesar 68%. Identifikasi menggunakan FTIR, 1H dan 13C NMR menunjukkan bahwa asam adipat hasil konversi dari sikloheksanol-sikloheksanon sesuai dengan asam adipat standar dari kepustakaan. Analisis menggunakan GC-MS mengindikasikan pembentukan beberapa produk samping hasil konversi sikloheksanol-sikloheksanon menggunakan katalis H5[a-BW12O40] dan H4[a-SiW12O40]."

"Tobacco stalk (TS), which is one type of lignocellulosic material, has a xylan content of up to 21.9%. Lignocellulosecan be used to produce xylooligosaccharides (XOs). XOs are dietary fibers that have prebiotic activity. This studyaimed to produce XOs from tobacco stalk xylan using xylanase from Streptomyces sp. BO 3.2. After the TS wasdelignified, the xylan was extracted using the alkali method. The delignification process, which used 1% natriumhypoclorite (NaOCl), decreased the lignins from 32.93% to 18.15%. Xylan extraction was conducted using 10%natrium hydoroxide (NaOH); this extraction produced xylan of 15.53% (w/w). The xylanase produced by Streptomycessp. BO 3.2 on a 0.5% TS medium had 5.92 U/mL of activity, with the optimum condition occurring at pH 5.5 and atemperature of 60 °C. The xylanase was stable, at temperature 4 °C and 30 °C for 120 hours. The xylanaseStreptomyces sp. BO 3.2 was capable of hydrolyzing 2% TS xylan and 2% beechwood xylan during the first, third,sixth, and twelfth hours of incubation time; it also produced XOs with degrees of polymerization (DP) of 2.18 and 2.15,respectively. A Thin layer chomatography (TLC) analysis indicated that the hydrolysis products were XOs with theabsence of xylose, glucose, and arabinose.Produksi Xilooligosakarida dari Tangkai Tembakau Menggunakan Streptomyces sp. BO 3.2. Tangkai tembakaumerupakan salah satu limbah lignoselulosa yang memiliki kandungan xilan sebesar 21,9%. Lignoselulosa dapatdigunakan sebagai bahan baku untuk produksi xilooligosakarida. Xilooligosakarida (XOs) merupakan oligosakaridayang merupakan dietary fiber yang memiliki aktivitas prebiotik. Penelitian ini bertujuan untuk produksixilooligosakarida dari xilan tangkai tembakau secara enzimatik menggunakan xilanase Streptomyces sp. BO 3,2. Xilantangkai tembakau diekstraksi secara alkali. Deliginifikasi dilakukan dengan mengunakan natrium hipokorit (NaOCl) 1%mampu menurunkan kandungan lignin dari 32,93% menjadi 18,15%. Ekstraksi xilan tangkai tembakau denganmenggunakan natrium hidroksida (NaOH) 10% mampu mengasilkan rendemen kandungan xilan sebesar 15,53 %.Produksi xilanase Streptomyces sp. BO 3,2 pada media xilan tangkai tembakau 0,5% memiliki aktivitas sebesar 5,92U/mL dengan kondisi optimum pada pH 5,5 dan suhu 60 °C. Xilanase Streptomyces sp. BO 3,2 stabil pada suhu 4 °Cdan 30 °C selama 120 jam. Xilanase Streptomyces sp. BO 3.2 (4.40 U/mL) mampu menghidrolisis xilan tangkaitembaku 2% dan xilan beechwood 2% pada waktu inkubasi 1, 3, 5, dan 12 jam dan mampu menghasilkanxilooligosakarida dengan derajat polimerasi masing-masing 2,18 dan 2,15. Analisis Thin layer chromatography (TLC)menunjukkan produk hidrolisis berupa xilooligosakarida tanpa adanya xilosa, glukosa, dan arabinosa."

"ABSTRAKAmmonia and phosphorus have been recognized as the cause of eutrophication in surface water. Chuat Man Canal is faced with water quality degradation problem due to the high concentrations of ammonia and total phosphorus in the water body that makes it unsuitable for fish ponds. Removal of ammonia and phosphorus by the adsorption process is simple and not requires chemical use. In addition, ammonia is well adsorbed by activated carbon and zeolite while phosphorus is adsorbed by zeolite. This research used zeolite and activated carbon for the adsorption of ammonia and total phosphorus. The results of laboratory experiments at 30 °C 200 rpm 60 minutes, revealed that adsorption of ammonia using zeolite correlated with Freundlich isotherm (R2 = 0.9031). For ammonia adsorption using activated carbon, it correlated with Langmuir (R2 = 0.9596) and Freundlich (R2 = 0.9113) isotherms, respectively. For field experiment, 9 zeolite and activated carbon adsorbent pads with ratio of 1.6:1 by weight were placed across the canal sections. Each pad had 2 openings and each opening contained its adsorbent volume of 1.0 × 0.015 × 0.6 m3 (width × length × height). The front opening contained 5 kg of activated carbon while the back part contained 8 kg of zeolite. During the study, water flow velocity at surface of water was ranged from 0.022 - 0.027 m/s. Concentration of ammonia in influent and effluent was ranged from 1.755- 8.817 mg/L and 1.473-7.063 mg/L, respectively while that for total phosphorus was ranged from 0.045 - 0.095 mg/L and 0.042 - 0.089 mg/L, respectively. The maximum removal efficiency occurred 20 and 43 minutes after installation of the adsorption pads which were 6.73% for total phosphorus and 23.17% for ammonia, respectively."

"This study utilized an eco-friendly heterogeneous catalyst in the synthesis of ester via esterification of ethanol andacetic acid under refluxing conditions. The amount of acetic acid converted was determined by titrimetric method.Aluminum pillared material was produced from natural clay by ion exchange and calcined at 473 K. Powdered X-Raydiffraction (PXRD), Fourier Transform Infra-Red (FT-IR) and BET gas sorption analysis were employed to characterizethe pillared material. The result revealed that significant improvement on physicochemical characteristics of the naturalclay occurred as a result of pillaring. The results also revealed that the conversion of acetic acid was dependent on thecatalyst/feed ratio of 2:2:1. The maximum conversion of acetic acid of 95.79% was obtained at the reaction temperatureof 363 K and 150 minutes. The pillared clay material is more active in the conversion of acetic acid than the naturalbentonite clay. This study illustrated that pillared bentonite clay is an eco-friendly solid catalyst for use in theproduction of chemical precursors for several industrial products.Penggunaan Katalis Ramah Lingkungan dalam Produksi Ester. Penelitian ini memanfaatkan katalis heterogenramah lingkungan pada sintesis ester melalui esterifikasi etanol dan asam asetat dalam keadaan refluks. Jumlah asamasetat yang terkonversi ditentukan dengan metode titrimetri. Material berpilar aluminium dibuat dari tanah lempungalam melalui proses tukar kation dan dikalsinasi pada 473 K. Difraksi sinar-X untuk bubuk (PXRD), Fourier TransformInfra-Red (FT-IR) dan analisi sorpsi gas BET digunakan untuk karakterisasi material berpilar tersebut. Hasilmenunjukkan adanya penyempurnaan yang signifikian pada karakter psiko-kimia dari tanah lempung alami sebagaihasil dari pilarisasi. Hasil menunjukkan pula bahwa konversi asam asetat bergantung pada rasio katalis/umpan, sebedari2:2:1. Konversi maksimum asam asetat sebesar 95.79% diperoleh pada suhu reaksi 363 K dan 150 menit. Materialtanah lempung terpilar terlihat lebih aktif pada komversi asam asetat dibandingkan dengan tanah lempung bentonitalami. Penelitian ini member gambaran tentang bentonit terpilar sebagai katalis padat ramah lingkungan untukdigunakan dalam pembuatan prekursor bahan kimia untuk berbagai produk industri."

"The recycling of residual agricultural biomass using anaerobic digestion allows for the recovery of biomass carbon andnutrients as sources of energy and fertilizer. The obstacles that are encountered in this process include thelignocellulosic structure of biomass tissue and its high carbon-to-nitrogen (C:N) ratio. This study evaluates the codigestionsystem of pretreated sorghum stalks and wastewater sludge. The stalks were pretreated by partial biooxidationto improve their bacterial accessibility. The digesters were fed a mixture of stalk and sludge at ratios of 100:0,80:20, 60:40, and 40:60 (total solids [TS] basis). The digesters were run in batches at 35-36 °C, with an initial TS of15%. The digesters? performance was evaluated in terms of biogas production rate and yield. The digesters that wererun with feed ratios of 80:20 and 60:40 showed shorter lag phase, higher biogas generation rates, and higher biogasyields compared to those run with feed ratios of 100:0 and 40:60. The highest specific biogas production (of 122 L/kgTS) was achieved by the digesters run at ratios of 80:20 and 60:40. The digesters run only with stalks (ratio 100:0)resulted in specific gas production of 67 L/kg TS, whereas those fed on a feed ratio of 40:60 generated only 13 L/kg TS.We conclude that the co-digestion of sorghum stalks and wastewater sludge at a proper ratio improves biogasproduction.Pencernaan Campuran Batang Sorgum dan Sludge untuk Produksi Biogas. Daur ulang residu biomassa pertanianmenggunakan pencernaan anaerobik memungkinkan untuk memanfaatkan karbon dan nutrisi dari biomassa tersebutsebagai sumber energi dan pupuk. Kendala yang dihadapi dalam proses ini meliputi struktur lignoselulosa biomassa dannisbah karbon terhadap nitrogen (C:N) yang tinggi. Studi ini mengevaluasi sistem pencernaan campuran batang sorgumdan sludge penanganan limbah cair industri. Sebelumnya dilakukan perlakuan awal terhadap batang sorgum denganbio-oksidasi parsial untuk meningkatkan aksesibilitas bakteri terhadap biomassa tersebut. Digester diberi umpancampuran batang sorgum dan lumpur pada nisbah 100:0, 80:20, 60:40, dan 40:60 (basis total padatan [TS]). Digesterdioperasikan secara curah pada 35-36 °C, dengan TS awal 15%. Kinerja digester dievaluasi berdasarkan laju produksidan volume biogas. Digester yang dioperasikan dengan rasio umpan 80:20 dan 60:40 menunjukkan fase adaptasi yanglebih pendek, laju generasi biogas yang lebih tinggi, dan volume produksi biogas yang lebih tinggi dibandingkandengan hasil yang diperoleh dari digester yang dioperasikan dengan rasio umpan 100:0 dan 40:60. Produksi biogasspesifik tertinggi (122 L/kg TS) dicapai pada digester yang dioperasikan pada nisbah 80:20 dan 60:40. Digester yangdioperasikan dengan umpan batang sorgum saja (nisbah 100:0) menghasilkan produksi biogas spesifik 67 L/kg TS,sedangkan yang diberi umpan dengan nisbah 40:60 hanya menghasilkan 13 L/kg TS. Disimpulkan bahwa pencernaancampuran batang sorgum dan sludge pada proporsi yang tepat meningkatkan produksi biogas."

"Vinblastine and vincristine are secondary metabolites from Madagascar periwinkles that have a very high economicvalue as chemotherapy drugs. These compounds are naturally produced in a very low quantity in planta. One promisingalternative method for vinblastine and vincristine production is to use a treatment that can trigger plant stress responsein vitro. This study has been done to evaluate the effect of drought stress using polyethylene glycol (PEG) on vinblastineand vincristine production in the C. roseus callus culture, which were grown on medium Zenk supplemented with plantgrowth regulators (PGR) 1 μM NAA + 10 μM Kinetin to induce laticifer and idioblast differentiation. 13-week-old calluscultures were then treated with 0%, 6%, 9%, and 12% (w/v) PEG4000 each for 0, 24, 48, and 72 hours. Biochemical analysiswas performed using HPLC to determine the levels of vinblastine and vincristine, while the presence of differentiated cells(idioblasts and laticifers) was determined using a histochemical method. Protein profiles of the culture were determined bySDS-Page. The results showed that drought treatment with PEG4000, until the concentration was 12% (w/v), did notsignificantly affect the production of vinblastine and vincristine, but might affect terpenoid production. Histochemicalanalysis confirmed the presence of idioblasts, non-elongated laticifers, and laticifers that were producing and accumulatingterpenoids highest in the 12% PEG treatment. PEG treatments also did not change the protein profile of callus.Produksi Senyawa Viblastin dan Vincristin pada Kultur Kalus Tanaman Tapak Dara (Catharanthus roseus (L.) G.Don) dengan Pemberian Cekaman Menggunakan Polietilena Glikol (PEG). Vinblastin dan vincristine merupakansenyawa metabolit sekunder dari tanaman Tapak Dara yang memiliki nilai ekonomi tinggi sebagai obat kemoterapikanker. Kedua senyawa ini hanya diproduksi dalam jumlah yang sangat sedikit pada tumbuhan. Salah satu metodealternatif yang menjanjikan untuk meningkatkan produksinya adalah dengan pemberian cekaman pada kultur in vitro.Telah dilakukan penelitian dengan tujuan untuk menentukan pengaruh pemberian cekaman kekeringan menggunakanpolyethylene glycol (PEG) terhadap produksi senyawa vinblastin dan vincristine pada kultur agregat C. roseus yang ditanampada medium Zenk dengan penambahan zat pengatur tumbuh (ZPT) NAA 1 μM + Kinetin 10 μM untuk menginduksipembentukan kelenjar latisifer dan sel idioblas. Kalus yang berusia 13 minggu kemudian diberi perlakuan cekamankekeringan menggunakan PEG4000 0%, 6%, 9%, dan 12% (w/v) masing-masing selama 0, 24, 48, dan 72 jam. Analisisdilakukan secara histokimia untuk menguji keberadaan latisifer pada kalus dan biokimiawi untuk menentukan kadarvinblastin dan vincristine dengan menggunakan HPLC. Selain itu dilakukan pula analisis profil protein dengan SDSPage.Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian cekaman kekeringan dengan menggunakan PEG4000 hinggakonsentrasi 12% (w/v) tidak berdampak signifikan terhadap produksi senyawa vinblastin dan vincristine namun didugaberdampak pada pembentukan senyawa terpenoid. Sel idioblas dan latisifer yang mengandung terpenoid dalam jumlahrelatif banyak ditemukan pada perlakuan PEG 12%. Perlakuan dengan PEG juga tidak berdampak pada perubahanprofil protein kalus. Analisis protein menunjukkan bahwa seluruh perlakuan memiliki profil protein yang sama."

"The purposes of this study was to identify the optimum concentration of the lytic enzyme Glucanex for protoplastisolation and to conduct fusion for the purpose of increasing inulinase production. The study performs the protoplastfusion technique using Pichia manshurica and Rhodosporidium paludigenum. Protoplast fusion consists of a series ofstages: protoplast isolation, protoplast fusion, protoplast regeneration, and analysis of hybrid fusion results. Protoplastisolation and fusion success rate are determined by various factors, including age of the culture, media type, and type oflytic enzymes used. Hybrid results were analyzed using a fungicide as a marker and measuring specific growth rate (μ)of the hybrid compared with parental growth rates. Results demonstrated that a concentration of 4 mg/mL of Glucanexproduces the greatest number of protoplasts, 7.2 x 1010 (cell/mL) for P. manshurica and 8.8 x 1010 (cell/mL) for Rh.paludigenum. The results of analysis of hybrid fusions indicate that the study has identified a new fusant, called fusantF4. Fusant F4 is capable of producing the highest inulinase, 0.6892 IU, compared with parentals P. manshurica, 0557IU, and Rh. paludigenum, 0.3263 IU. Fusant F4 has specific growth rate (μ) of 0.3360/h and generation time (g) of2.0629 h.Fusi Protoplas Intergenus antara P. manshurica dan Rh. paludigenum untuk Meningkatkan Produksi Inulinase.Teknik fusi protoplas yang dilakukan pada penelitian ini secara intergenus yaitu antara Pichia manshurica danRhodotorula paludigenum. Fusi protoplas dilakukan melalui serangkaian tahapan yaitu: isolasi protoplas, proses fusiprotoplas, regenerasi protoplas dan analisis hibrid (fusant) hasil fusi. Tingkat keberhasilan isolasi dan fusi protoplassangat ditentukan oleh berbagai faktor, diantaranya umur biakan, jenis medium, enzim litik, dan jenis fusogen yangdipergunakan. Hasil hibrid (fusant) yang diperoleh selanjutnya dianalisis dengan menggunakan fungisida sebagaimarker dan kecepatan pertumbuhan spesifik (μ) hibrid (fusant) dibandingkan dengan parental. Tujuan penelitian adalahuntuk memperoleh konsentrasi enzim Glucanex yang optimum untuk mengisolasi protoplas, dan untuk memperolehfusant yang mampu menghasilkan inulinase tinggi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi enzim litikGlucanex 4 mg/mL mampu menghasilkan protoplas terbaik, sebesar 7,2 x 1010 (sel/mL) untuk P. manshurica dan 8,8 x1010 (sel/mL) untuk Rh. paludigenum. Hasil analisis hibrid (fusant) menunjukkan bahwa pada peneltiian ini berhasildiperoleh fusant baru, yaitu fusant F4. Fusant F4 mampu menghasilkan inulinase lebih tinggi 0,6892 IU, lebih baikdibandingkan dengan parental P. manshurica 0,557 IU, dan Rh. paludigenum 0,3263 IU, memiliki kecepatanpertumbuhan spesifik (μ) sebesar 0,3360/jam, dan waktu generasi (g) 2,0629 jam."

"Determinasi Karbofuran pada Kondisi Kromatografi Cair Interaksi Hidrofilik menggunakan TSKgel®Amide-80 sebagai Fase Diam. Kromatografi cair interaksi hidrofilik (KCIH) digunakan dengan memanfaatkan kolom kapiler yang ramah lingkungan dalam rangka mempelajari perilaku retensi karbofuran. Perilaku retensi karbofuran diidentifikasi menggunakan beberapa jenis fase diam yang bersifat polar. Beberapa kondisi telah dilakukan untuk menyelidiki perilaku retensi karbofuran seperti studi perbandingan kolom TSKgel®Amide-80 dengan kolom polar lainnya, perbandingan perilaku retensi studi karbofuran pada berbagai panjang gelombang, efek air dalam mode KCIH, pengaruh konsentrasi buffer pada mode KCIH, dan kinerja analitik. Hasil penelitian menunjukkan bahwa TSKgel®Amide-80 lebih baik dibandingkan dengan fase diam polar lain dalam penentuan karbofuran. Selain itu panjang gelombang 251 dan 254 nm menghasilkan absorbansi lebih tinggi untuk karbofuran daripada yang lain. Sebagai tambahan, peningkatan kadar air dan konsentrasi garam penyangga pada fase gerak menyebabkan waktu retensi lebih cepat. Nilai perolehan kembali metode ini adalah 101 ± 10,1, sedangkan limit deteksi dan limit quantifikasi berturut-turut diperoleh sebesar 0,66 ppm dan 2,22 ppm. Disimpulkan bahwa TSKgel®Amide-80 memberikan hasil yang baik dalam penetapan karbofuran meskipun digunakan kromatografi cair kapiler dengan panjang kolom 10 cm.

---

Hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) equipped with an environmentally friendly capillary column was employed to investigate the retention behavior of carbofuran; a polar stationary phase was used as well. Several conditions were conducted to investigate the retention behavior of carbofuran, such as a comparison study TSKgel®Amide-80 with another polar column, a comparison study retention behavior of carbofuran on various wavelengths, the water content effect on HILIC mode, the effect of buffer concentration on HILIC mode, and the analytical performance of carbofuran. The results showed that TSKgel®Amide-80 exhibited a better performance than other polar stationary phases in carbofuran determination, and observations at wavelengths of 251 and 254 nm showed higher absorbance for carbofuran than others. In addition, the increase of water content and salt buffer concentration in the mobile phase led to a shorter retention time. The recovery of this method was 101 ± 10.1%, while the limit of detection and the limit of quantification were 0.66 ppm and 2.22 ppm, respectively. Consequently, TSKgel®Amide-80 offers a good performance in carbofuran determination, even with the application of 10 cm length column capillary liquid chromatography."