Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Latar Belakang : Proses pematangan sperma terjadi karena adanya interaksi antara sel sperma dan protein yang disekresikan oleh sel epitel yang melapisi saluran epididimis, sehingga menyebabkan perubahan morfologi dan biokimia pada membran spermatozoa. Sekresi protein pada saluran epididimis ditentukan oleh gen-gen yang diekspresikan secara spesifik di region tertentu misalnya pada region initial segmen, caput, corpus atau cauda sehingga pada masing-masing segmen terbentuk lingkungan spesifik (microenvironment) yang diperlukan untuk proses pematangan sperma. Gen yang menyandi protein yang terlibat dalam proses pematangan sperma diekspresikan secara spesifik pada epididimis dan ekspresinya diregulasi oleh androgen. Salah satu gen yang diduga berperan dalam proses pematangan sperma adalah gen Serpina1f. Berdasarkan urutan asam amino, Serpina1f dianggap sebagai anggota baru dari keluarga serpin dengan fungsi putatif sebagai serin protease inhibitor. Karakterisasi Serpina1f pada organ reproduksi pria khususnya epididimis dapat memberikan petunjuk mengenai perannya dalam proses pematangan sperma.Tujuan : Mengkarakterisasi gen Serpina1f di epididimis mencit.Desain : Penelitian ini menggunakan analisis bioinformatika dan eksperimentalMetode : Struktur gen, batas ekson-intron dan domain fungsional serta deteksi signal peptide pada Serpina1f dilakukan analisis bioinformatika. Untuk menganalisis ekspresi SERPINA1F tingkat protein dilakukan western imunoblotting, sedangkan untuk mengetahui lokasi protein SERPINA1F dilakukan imunohistokimia dan imunositokimia.Hasil : SERPINA1F merupakan anggota family SERPIN. Berdasarkan analisis Signal peptide, SERPINA1F merupakan protein sekretori. Hasil imunohistokimia pada jaringan epididimis mencit menunjukkan adanya reaksi antibodi dengan terwarnainya nukleus dan sitoplasma pada sel epitel initial segment dan caput. Sedangkan pada corpus dan cauda SERPINA1F terdeteksi hanya pada sitoplasma. Hasil analisis western imunoblotting dan imunositokimia pada protein sperma menunjukkan adanya asosiasi SERPINA1F dengan spermatozoa dan terdapat di seluruh bagian spermatozoa.Kesimpulan : SERPINA1F memiliki signal peptide pada asam amino 1 - 27 dan termasuk protein sekretori. Berdasarkan urutan asam aminonya, SERPINA1F yang termasuk famili SERPIN. Protein SERPINA1F diekspresikan di sel epitel initial segment, caput, corpus dan cauda. SERPINA1F berasosiasi dengan spermatozoa dan terdapat pada seluruh bagian spermatozoa.

---

Background: Sperm maturation occur due to the interaction between the sperm cell and the proteins secreted by the epithelial cells lining the epididymis duct, causing morphological and biochemical changes in the sperm membrane. The secretion of proteins in epididymis duct is determined by genes that are expressed specifically in certain regions, for example in the region of the initial segment, caput, corpus or cauda that each segment forms microenvironment that is required for sperm maturation process. Genes that encode proteins involved in the process of sperm maturation in the epididymis specifically expressed and its expression is regulated by androgens. One of the genes thought to play a role in sperm maturation process is Serpina1f. Based on the amino acid sequence, Serpina1f considered as a new member of the serpin family with putative functions as a serine protease inhibitor. Characterization Serpina1f on male reproductive organs, especially the epididymis may provide a clue as to its role in sperm maturation process.Objective: To characterize Serpina1f in the epididymis of mice.Design: This study used a bioinformatics analysis and experimental.Methods: Bioinformatics analysis were used to know gene structure, exon-intron boundaries and functional domains as well as the detection of signal peptide on Serpina1f. To analyze protein expression levels SERPINA1F performed western immunoblotting, whereas for the location of the protein immunohistochemistry and immunocytochemistry SERPINA1F done.Results: SERPINA1F a member of the serpin family. Based on the analysis of signal peptide, a protein secretory SERPINA1F. The results of immunohistochemistry on epididymis tissue of mice showed an antibody reaction with colored nucleus and cytoplasm in epithelial cells of the initial segment and caput. While SERPINA1F detected only in the cytoplasm corpus and cauda. The results of western imunoblotting analysis and immunocytochemistry showed SERPINA1F associated with spermatozoa and found in all parts of the spermatozoa.Conclusion: SERPINA1F has a signal peptide at amino acids 1-27 and include secretory proteins. Based on their amino acid sequence, which includes SERPINA1F serpin family. The protein is expressed in epithelial cells SERPINA1F initial segment, caput, corpus and cauda. SERPINA1F associated with spermatozoa and found on all parts."

"ABSTRAKSalah satu kendala yang dihadapi manusia saat ini adalah pertambahan penduduk yang tidak terkendali yang menimbulkan banyak masalah baru di berbagai aspek kehidupan. Oleh sebab itu, pengendalian pertumbuhan penduduk harus dilakukan dengan berbagai metode kontrasepsi. Pengembangan kontrasepsi pria non-hormonal dengan menghambat proses pematangan sperma di epididimis menjadi hal yang menjanjikan. Sayangnya, gen yang berperan di dalam proses pematangan sperma di epididimis masih belum banyak dipelajari. Kami menganalisis beberapa kandidat gen yang diekspresikan di epididimis, salah satunya adalah Defensin Beta-42 (Defb42). Beberapa langkah metode yang kami lakukan adalah isolasi epididimis dan ekstraksi RNA, analisis bioinformatika, dan real-time Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) untuk menganalisa ketergantungan ekspresi terhadap androgen dari gen Defb42 karena pematangan sperma bergantung pada androgen. Selain itu, proses pematangan sperma juga terjadi akibat interaksi antara sperma dan protein yang disekresikan oleh epitel epididimis. Oleh sebab itu, peptida sinyal harus dianalisis juga untuk mengecek apabila gen ini adalah protein sekretori. Hasilnya adalah gen ini diregulasi oleh androgen dan memiliki peptida sinyal. Hal ini membuat gen Defb42 menjadi kandidat gen yang menjanjikan untuk diteliti lebih lanjut dalam upaya pengembangan kontrasepsi non-hormonal pada pria.

---

ABSTRACTOne of the problem nowadays is the uncontrolled population growth. This raises many other problems in every aspect of life. Therefore, the population growth must be controlled with many types of contraceptive agents. The development of male non-hormonal contraceptive agent by inhibiting the sperm maturation process in epididymis seems to be promising. We analyzed several candidates of gene which are expressed in epididymis; one of them is Defensin Beta-42 (Defb42) gene. Several method we conducted in this research are epididymis isolation and RNA extraction, bioinformatics analysis, and real time Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) to analyze the expression dependency towards androgen of Defb42 gene because the sperm maturation is androgen-dependent process. Besides, the sperm maturation process occurs due to the interaction between sperm and protein secreted by epididymal epithelium. Therefore, the signal peptide has to be analyzed to confirm whether the candidate gene is a secretory protein. The results are this gene is regulated by androgen and has signal peptide properties. Therefore we can conclude that the gene is promising to be studied further in effort to develop male non-hormonal contraceptive agent."

"ABSTRAKLatar Belakang: Pematangan spermatozoa di epididimis terjadi melalui interaksi antara spermatozoa dengan protein yang disekresikan oleh sel epitel yang melapisi duktus epididimis. Sekresi protein tersebut menciptakan microenvironment yang diregulasi oleh gen-gen tertentu. Studi sebelumnya menunjukkan bahwa gen yang terlibat dalam pematangan spermatozoa pada umumnya terekspresi secara spesifik di epididimis dan dipengaruhi oleh androgen. Spink2 merupakan salah satu gen yang terekspresi di epididimis, namun regulasi ekspresinya masih belum diketahui. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengkarakterisasi ekspresi dan regulasi gen Spink2 pada epididimis mencit jantan.Metode: Analisis secara in silico digunakan untuk mengetahui struktur gen dan prediksi sinyal peptida, serta domain fungsional gen Spink2. Quantitative real-time RT-PCR digunakan dalam mengukur ekspresi relatif gen Spink2 pada analisis spesifisitas jaringan, ketergantungan terhadap androgen dan faktor testikuler, serta post-natal development.Hasil: Spink2 termasuk dalam famili serine protease inhibitor yang ditandai dengan adanya domain Kazal type 2. Analisis signal peptide menunjukkan bahwa Spink2 merupakan protein sekretori. Spink2 terekspresi di testis dan epididimis, dengan ekspresi tertinggi berada di kaput epididimis. Ekspresi Spink2 pada mencit yang digonadektomi mengalami peningkatan setelah 6 jam, kemudian menurun mulai dari hari ke-1 hingga hari ke-5. Pemberian testosteron mampu mempertahankan ekspresi Spink2 pada 3 dan 5 hari setelah gonadektomi. Selain itu, pada analisis pengaruh faktor testikuler, ekspresi Spink2 menunjukkan adanya regulasi dari faktor testikuler pada semua kelompok setelah dilakukan efferent duct ligation EDL . Spink2 menujukkan regulasi post-natal yakni mulai terekspresi pada umur mendekati 22 hari.Kesimpulan: SPINK2 merupakan protein sekretori yang terekspresi pada kaput epididimis, serta diregulasi oleh androgen dan faktor testikuler. Spink2 tidak terekspresi secara konstitutif. Berdasarkan data tersebut Spink2 sangat berpotensi terlibat dalam proses pematangan spermatozoa di epididimis. Penelitian lebih lanjut diperlukan untuk mengkonfirmasi potensi tersebut.

---

ABSTRACTBackground Sperm maturation in the epididymis occurs through interactions between sperm and proteins secreted by epithelium cells lining the epididymal duct. The secretion of these proteins creates a microenvironment that is regulated by certain genes. Previous studies showed that genes which are involved in sperm maturation process are expressed specifically in the epididymis and regulated by androgen. Spink2 is one of the epididymal genes, but the regulation of its expression is still unknown. Therefore, this study was aimed to characterize Spink2 expression and its regulation in the mouse epididymis.Method s In silico analysis was performed to determine the gene structure and identify the signal peptide, as well as the functional domain of Spink2. Quantitative real time RT PCR was performed to measure relative expression of Spink2 in the analyses of the tissue specificity, androgen dependency, testicular factor and post natal development.Result s Spink2 belongs to the serine protease inhibitor family which is characterized by the presence of Kazal type 2 domain. Signal peptide analysis showed that Spink2 amino acid sequence contains a signal peptide, indicating Spink2 is a secretory protein. Spink2 was expressed specifically in the testis and epididymis, with the highest level of its expression was in the epididymal caput. Spink2 expression increased after six hours and started to decrease on day 1 throughout day 5. Interestingly, administration of exogenous testosterone was able to maintain expression at the physiological level. In addition, Spink2 was slightly affected by testicular factors. During post natal development, Spink2 start to be expressed at day 22 before increased dramatically throughout day 60.Conclusion s Spink2 is a secretory protein that is expressed in caput region of the mouse epididymis and regulated by androgen. Spink2 is not constitutively expressed throughout development. Based on our data, may be involved in epididiymal sperm maturation process. Further studies are required to confirm its role. "

"Latar belakang: Alopesia androgenetik (AAG) merupakan penyebab kebotakan rambut yang paling sering ditemui dan mengganggu kualitas hidup. Meskipun AAG tidak mengancam nyawa, namun berbagai studi menunjukkan bahwa AAG tidak hanya dianggap sebagai penyakit kulit/estetik semata namun berkaitan dengan kondisi-kondisi sistemik, salah satunya adalah sindrom metabolik (SM). Beberapa studi menunjukkan juga bahwa pola kebotakan pada AAG memiliki risiko yang berbeda terhadap penyakit tertentu. Penelitian ini bertujuan hubungan antara pola kebotakan AAG tipe verteks dan tipe frontal terhadap SM. Metode: Penelitian ini menggunakan desain studi potong lintang yang dilakukan terhadap 24 laki-laki dengan AAG tipe verteks dan 24 laki-laki dengan AAG tipe frontal. Dilakukan anamnesis dan pemeriksaan fisik untuk menegakkan diagnosis AAG berdasarkan skala Norwood-Hamilton, serta dilakukan pengambilan foto, pemeriksaan trikoskopi, TrichoScan® pada masing-masing subjek penelitian. Sindrom metabolik ditegakkan berdasarkan kriteria National Cholesterol Education Program (NCEP) Adult Treatment Panel (ATP) III melalui pemeriksaan fisik dan laboratorium darah vena. Hasil: Prevalensi SM pada kelompok AAG tipe verteks adalah sebesar 37,5%, sedangkan pada tipe frontal sebesar 20,8%. Tidak didapatkan hubungan antara SM dengan AAG tipe verteks ataupun tipe frontal (p = 0,341). Pada kelompok AAG tipe verteks didapatkan prevalensi hipertensi yang lebih tinggi secara bermakna dibandingkan kelompok AAG tipe frontal (p = 0,043). Tidak ada perbedaan bermakna gambaran trikoskopi ataupun TrichoScan® antara AAG tipe verteks dan tipe frontal. Kesimpulan: Prevalensi SM pada kelompok AAG tipe verteks lebih besar dibandingkan pada kelompok AAG tipe frontal. Tidak ada hubungan bermakna antara pola kebotakan AAG dengan SM. Tidak ada hubungan bermakna gambaran trikoskopi dan TrichoScan® antara kelompok AAG tipe verteks dengan tipe frontal.

---

Background: Androgenetic alopecia (AAG) is the most common cause of hair loss, impacting quality of life. Although AAG is not life-threatening, various studies indicate that it is not merely a cosmetic skin condition but is associated with specific systemic conditions, including metabolic syndrome (MS). Some studies also suggest that the pattern of baldness in AAG poses varying risks for specific diseases. This research aims to explore the relationship between AAG vertex and frontal patterns of baldness and metabolic syndrome.

Methods: This study adopts a cross-sectional design involving 24 males with vertex AAG and 24 males with frontal AAG. Anamnesis and physical examinations were conducted to diagnose AAG using the Norwood-Hamilton scale. Each subject underwent photography, trichoscopy, and TrichoScan®, examination. Metabolic syndrome diagnosis followed the National Cholesterol Education Program (NCEP) Adult Treatment Panel III (ATP III) criteria through physical examination and venous blood laboratory tests.

Results: The prevalence of metabolic syndrome in the AAG vertex group is 37.5%, whereas in the frontal group, it is 20.8%. No significant relationship was found between metabolic syndrome and AAG vertex or frontal types (p = 0.341). The AAG vertex group showed a significantly higher prevalence of hypertension than the frontal group (p = 0.043). There were no significant differences in trichoscopy or TrichoScan®¸ findings between AAG vertex and frontal types.

Conclusion: The prevalence of metabolic syndrome is higher in the AAG vertex group compared to the AAG frontal group. There is no significant association between metabolic syndrome and the pattern of AAG baldness. Additionally, there is no significant difference in trichoscopy and TrichoScan®¸ findings between AAG vertex and frontal groups."

"ABSTRAKTerapi Androgen Deprivation Therapy (ADT) adalah salah satu tatalaksana untuk pasien dengan kanker prostat stadium lanjut yang berhubungan dengan adanya perubahan dari komposisi masa tubuh dan mencetuskan adanya resistensi dari insulin perifer. Penelitian ini dilaksanakan di RSUP H. Adam Malik, Medan sejak Juni 2014 hingga Juni 2015. Terapi ADT menyebabkan peningkatan secara signifikan sebelum dan 6 bulan sesudah pemberian kadar gula darah post prandial 121.12 21 mg/mL vs 134.64 33.35 mg/mL, p-value=0.011 dan Glycosylated hemoglobin HbA1C 5 0.5 vs 5.5 0.79 , p-value = 0.000 . Pemberian ADT selama 3 sampai 6 bulan juga secara signifikan meningkatkan kadar Trigliserida TG 104.4 38.67 vs 131.2 32.27 vs 127 33.43, p-value = 0.005 .

---

ABSTRACTTherapy ADT is one of the treatments in patients with advanced prostate cancer in which has been linked to the changes in body mass composition and induction of insulin peripheral resistance in many studies. This research was conducted at Dr H. Adam Malik, Medan from June 2014 to June 2015. ADT administration is found to cause a significant elevation of 2 hour postprandial blood glucose 121.12 21 mg mL vs 134.64 33.35 mg mL, p value 0.011 and Glycosylated hemoglobin 5 0.5 vs 5.5 0.79 , p value 0.000 HbA1c after 6 months of therapy. Additionally, ADT administration within 3 and 6 months of duration had also significantly increased triglyceride TG level when compared to before treatment 104.4 38.67 vs 131.2 32.27 vs 127 33.43 respectively, P value 0.005 ."

"Epididimis adalah bagian dari alat reproduksi laki-laki yang berfungsi dalam pematangan sperma. Proses ini terjadi melalui interaksi antara sperma dan protein yang disekresikan oleh sel-sel epitel di epididimis. Protein-protein tersebut dikode oleh gen yang terekspresi secara spesifik di epididimis, salah satunya adalah Serpina1f. Akan tetapi, kebanyakan dari regulasi gen diatas belum dipahami dan perlu ditelilti, lebih lanjut. Serpina1f adalah salah satu gen yang menarik untuk di karakterisasikan. Gen ini diregulasi oleh androgen dan sudah dibuktikan oleg data yang diambil menggunakan mikroaray analisis. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisa struktur gen dari Serpina1f sebagai dasar untuk mempelajari fungsi dari gen tersebut lebih lanjut, dan juga distribusi jaringan untuk menyeleksi apakah gen Serpina1f hanya terekspresi di epididymis yang pada akhirnya akan menentukan apakah gen ini cocok dikembangkan menjadi kontrasepsi non-hormonal bagi pria. Penelitian ini dilakukan sejak Mei 2012 sampai Februari 2013 di Laboratorium Departemen Biologi Universitas Indonesia dan dilaksanakan dengan menggunakan analisa bioinformatika dan analisa ekspresi gen. Hasil penelitian menunjukan bahwa gen Serpina1f sangat dominan pada daerah initial segment pada epididimis mencit sehingga cocok untuk dikembangkan menjadi kontrasepsi non-hormonal bagi pria.

---

Epididymis is a part of male reproductive system which functions in the process of sperm maturation. This process is occurs by interaction between sperm and proteins that secreted by epithelial cells in the epididymis. Those proteins are encoded by epididymis specific genes, one of them is Serpina1f. However, many of those genes are not entirely well-characterized and need to be elaborated further. Serpina1f is one of the attractive genes to be characterized. It is regulated by androgen and has been proved by previous data obtained by microarray analysis.

This research was aimed to analyze gene structure of Serpina1f gene as a basis for more exploration regarding the function of this gene, and also to identify tissue distribution to determine whether Serpina1f gene is expressed only in epididymis, so that this gene is suitable to be developed as a target for non-hormonal male contraception.

This experiment was conducted from May 2012 to February 2013 in the Laboratory of Department of Biology Universitas Indonesia and it was performed by in-silico analysis and gene expression analysis. The result shows that Serpina1f gene is very dominant in initial segment in epididymis, thus suitable as a candidate for non-hormonal male contraception."

"Saat ini wanita sudah mempunyai kesempatan untuk bekerjadiluar rumah, baik yang bertujuan ekonomis ataupun untukmengembangkan potensi yang dimilikinya. Tetapi di lain pihakwanita tetap dituntut untuk sukses dalam rumah tangga. Artinyawanita dituntut untuk berperan ganda, sebagai wanita bekerja yangsekaligus pula sebagai ibu rumah tangga. Bagaimana dengan paraayah/suami saat ini ? Dengan bekerjanya ibu/istri, para suami seharusnya ikutturun 'tangan dalam mengerjakan pekerjaan rumah tangga. Padakenyataannya, para suami tampaknya tidak menambah waktunya untukbekerja di rumah. Oleh sebab itu, penulis tertarik untukmeneliti tingkah laku para ayah/suami dalam mengerjakan pekerjaanrumah tangga.Dalam konsep tradisional, sudah ada pembagian kerja antarawanita dan pria, dimana pembagian tersebut sudah tidak perlu lagiditegaskan. Tiap individu akan bertingkah laku sesuai denganperan jenis kélamin yang telah dibentuk oleh masyarakat.Kebalikan dari konsep tradisional adalah konsep androgini, dimanaindividu dapat bebas menentukan perilakunya tanpa terikat padaperan jenis kelamin. Dengan demikian individu dapatmengembangkan potensinya secara optimal.Remaja sebagai anggota keluarga, secara teoritis akanmengidentifikasikan diri dengan tokoh yang paling penting dalamhidupnya. Ayah sangat. memegang peranan penting dalam prosesidentifikasi ini. Dengan keadaan itu, penulis ingin melihathuhungan antara sikap remaja terhadap penerapan konsep androginidengan tingkah laku ayah dalam mengerjakan pekerjaan rumahtangga. Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah kuesionerskala sikap, kuesioner data pribadi/data kontrol dan kuesionerpembagian tugas rumah tangga. Dan subyek yang dipilih adalahayah dengan remaja putranya yang telah memasuki tahap remajaakhir.Hasil penelitian menunjukkan bahwa sikap remaja cenderungnegatif terhadap penerapan konsep androgini dalam mengerjakanpekerjaan rumah tangga. Dan tingkah laku ayah juga cenderung nonandroginious dalam mengerjakan pekerjaan rumah tangga. Walaupunantara sikap dan tingkah laku ayah sejalan, tetapi tidakditemukan hubungan yang signifikan antara keduanya. Hal tersebutmungkin terjadi karena alat yang kurang dapat memberi skor secaralebih halus atau remaja tidak hanya dipengaruhi oleh ayahnya sajadalam proses belajar konsep androgini, tetapi juga olehlingkungan di sekitarnya atau masyarakat luas yang masih memegangkonsep non androgini dalam mengerjakan pekerjaan rumah tangga.Untuk penelitian selanjutnya, diperlukan alat yang dapatmemberi skor lebih terinci sehingga dapat membedakan individuyang androgini dan non androgini."

"ABSTRAKLatar Belakang : Proses pematangan spermatzoa di epididimis terjadi melalui interaksi antara spermatozoa dengan berbagai protein yang disekresikan oleh epitel epididimis. Gen penyandi protein yang terlibat dalam proses maturasi ini masih banyak yang belum diketahui. Data penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa gen-gen yang berperan dalam proses maturasi sperma ekspresinya dipengaruhi oleh androgen. Sperm associated antigen11a (Spag11a) merupakan salah satu gen yang ekspresinya dipengaruhi oleh androgen (Sipila et al, 2006), namun masih belum diketahui apakah Spag11a berperan pada proses maturasi sperma di epididimis.Tujuan : Mengkarakterisasi gen Spag11a pada epididimis mencit jantan strain DDYDesain : Penelitian ini menggunakan analisis bioinformatik dan eksperimentalMetode : Struktur gen Spag11a dan deteksi signal peptide dianalisis secara in silico. Quantitative Real time RT-PCR digunakan untuk mengukur ekspresi relatif Spag11a pada analisis spesifisitas jaringan, ketergantungan terhadap faktor endokrin dan faktor testikular. Untuk menganalisis ekspresi gen Spag11a pada tingkat protein dilakukan Western Blot, sedangkan untuk mengetahui lokasi protein SPAG11A pada sel epididimis dilakukan imunohistokimia.Hasil : SPAG11A termasuk dalam famili protein defensin beta dan analisis signal peptide menunjukan bahwa SPAG11A merupakan protein sekretori. Spag11a dieskpresikan secara spesifik pada organ epididimis, ekspresi di organ lain sangat rendah. Satu hal yang menarik yakni selain menunjukkan spesifisitas organ, Spag11a juga menunjukan spesifisitas regional pada caput epididimis. Ekspresi Spag11a dipengaruhi oleh androgen, penurunan ekspresi Spag11a sangat bermakna (p<0,001) pada hari ke 3 setelah gonadektomi dan mencapai ekspresi paling rendah pada hari ke 5. Ekspresi Spag11a meningkat kembali setelah penambahan testosteron eksogen. Ekspresi Spag11a juga dipengaruhi oleh faktor testikular, dimana pada perlakuan parsial gonadektomi (gonadektomi testis kanan saja) terjadi penurunan ekspresi relatif Spag11a yang lebih cepat dan lebih signifikan pada epididimis kanan dibandingkan dengan epididimis kiri. Pada tingkat protein SPAG11A juga terekspresi secara spesifik pada caput, dan analisis immunohistokimia menunjukan SPAG11A diekspresikan oleh sel prinsipal. Kesimpulan : Berdasarkan karakter Spag11a yang merupakan gen penyandi protein sekretori, terekspresi secara spesifik pada caput epididimis dan diregulasi oleh androgen maka dapat disimpulkan Spag11a terlibat dalam proses maturasi sperma. Penelitian lebih lanjut dalam tingkat uji fungsi perlu dilakukan.

---

ABSTRACTBackground: Epididymal sperm maturation occurs through interactions between sperm and proteins sereted by epididymal epithelium. Genes encode for proteins involved in the sperm maturation process are still largely unknown. Previous studies showed that genes involved in sperm maturation are regulated by androgen. Sperm associated antigen 11a (Spag11a) is one of the epididymal genes influenced by androgen based on a global DNA microarray analysis (Sipila et al, 2006). However, little is known about the putative role of this gene in the sperm maturation process.Objective : To characterize expression and regulation of Spag11a genes in the mouse epididymis.Design : In silico analyses combined with experimental studyMethods : In silico analyses were used to predict Spag11a gene structure and signal peptide. Semi quantitative RT-PCR was used to measure the level of Spag11a expression in the tissue distribution, androgen dependency and testicular factors analyses. Western blot was performed to analyze gene expression at the protein level whereas immunocytochemstry was performed to localize SPAG11A in the epididymal cell.Results : SPAG11A is member of the defensin beta protein family and constitutes a secretory protein. Spag11a is expressed exclusively in the epididymis and not in other tissues. Moreover, Spag11a shows a region specific expression in the caput, typical for genes that is involved in creating a microenvironment suitable for sperm maturation. Spag11a expression is regulated by androgen. Significant decrease of Spag11a expression was observed after third day of gonadectomy (p<0.001). Interestingly, testosterone replacement therapy was able to bring the expression back to the normal level, indicating a high dependency on androgen. Besides androgen, testicular factor also slightly influence Spag11a expression. This was shown by partial gonadectomy experiment in which only the right testis was removed. Spag11a was down-regulated faster on the right epididymal caput compared to the left caput. Spag11a regional expression was also observed at protein level detected by Western immunoblot analyses showing a clear band in caput, not in other regions. Finally, the prediction that SPAG11A is a secretory protein was confirmed by immunocytochemical analyses showing a cell-specific expression in the principal cell. This cell type is known as the main secretor in the epididymal lumen.Conclusion : Based on the characters of Spag11a, it is most likely that this gene has a specific role in the epididymal sperm maturation. Further investigations using functional assays are needed to confirm the putative role."

"[ABSTRAKLatar belakang: Proses pematangan sperma terjadi melalui interaksi spermatozoa dengan protein yang disekresikan ke lumen oleh sel epitel epididimis. Sekresi protein pada epididimis ditentukan oleh gen-gen yang terekspresi spesifik di epididimis. Ekspresi gen di epididimis dapat dipengaruhi oleh androgen atau faktor testikular. CD52 telah diketahui terekspresi di epididimis, namun regulasi yang mempengaruhi ekspresi gen CD52 di epididimis belum diketahui. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menganalisis ekspresi dan regulasi gen CD52 agar dapat memprediksi perannya di epididimis mencit. Metode: Analisis bioinformatika dilakukan untuk memprediksi sinyal peptida dan domain fungsional dari CD52. Quantitative real time RT-PCR digunakan untuk mengukur ekspresi relatif gen CD52 pada analisis spesifisitas jaringan, ketergantungan terhadap androgen dan faktor testikular, serta postnatal development. Hasil: CD52 memiliki sinyal peptida yang menunjukkan ciri protein sekretori dan terekspresi secara spesifik di epididimis. Ekspresi CD52 yang tertinggi terdapat di bagian cauda. Ekspresi CD52 pada mencit diregulasi oleh androgen yang ditandai dengan penurunan pada hari pertama dan ketiga setelah digonadektomi dan pemberian testosteron eksogen setelah gonadektomi dapat menjaga ekspresi CD52 50% dari kadar normalnya. Eksperimen dengan memberikan reseptor androgen antagonis (flutamide) juga mendukung bahwa ekspresi CD52 sangat tergantung terhadap androgen. Ekspresi CD52 menurun sangat bermakna hingga mencapai 93% dibandingkan dengan kontrol. Selain androgen, ekspresi CD52 juga dipengaruhi oleh faktor testikular. Ekspresi CD52 mengalami penurunan bermakna dari hari pertama hingga kelima setelah perlakuan efferent duct ligation (EDL) hingga mencapai 75% dari kontrol. Selain itu ekspresi CD52 juga dipengaruhi oleh perkembangan pasca lahir. Ekspresi CD52 meningkat di hari ke-15 hingga hari ke-60 pasca lahir. Kesimpulan: CD52 merupakan gen penyandi protein sekretori yang terekspresi spesifik di epididimis pada region cauda dan regulasinya dipengaruhi oleh androgen, faktor testikular, dan perkembangan pasca lahir.

---

ABSTRACTBackground. Epididymal sperm maturation is occurs via interactions between sperm and proteins secreted by epididymal epithelium. These proteins are encoded by genes that are specifically expressed in a region-specific manner. Previous studies have demonstrated that epididymal genes are regulated by androgen and testicular factors. CD52 is an epididymal gene putatively involved in sperm maturation. However, the regulation of its expression in the epididymis has not been fully understood and little is known about its role during sperm maturation process. Therefore, this study was aimed to analyze the expression and regulation of CD52 in the mouse epididymis. Method. Bioinfomatic analyses were perfomed to predict signal peptides and functional domains of CD52. Quantitative real-time RT-PCR was used to analyze tissue distribution, androgen, testicular factors dependency and postnatal development. Results. CD52 amino acid sequence contains a signal peptide, indicating it is a secretory protein. CD52 exhibited region-spesific expression in the epididymis with the highest level was in cauda. Mice CD52 expression was regulated by androgen indicated by a decrease started at day 1 following a gonadectomy. Interestingly, testosterone replacement therapy was able to maintain the expression at 50% of normal level. Experiment by given androgen receptor antagonist, flutamide showed decrease of CD52 expression about 93% than control. It?s confirming that CD52 expression depend on androgen. Moreover, testicular factors also influenced CD52 expression. This was revealed by efferent duct ligation in which CD52 expression was reduced at day 1 to day 5 following the ligation. Finally, CD52 expression was developmentally regulated, this was indicated by increase in the level of expression start at day 15 postnatally. Conclusion: CD52 is a secretory protein and exhibited region-spesific expression in the cauda epididymis. It is regulated by androgen, testicular factors, and also affected by development stage. , Background. Epididymal sperm maturation is occurs via interactions between sperm and proteins secreted by epididymal epithelium. These proteins are encoded by genes that are specifically expressed in a region-specific manner. Previous studies have demonstrated that epididymal genes are regulated by androgen and testicular factors. CD52 is an epididymal gene putatively involved in sperm maturation. However, the regulation of its expression in the epididymis has not been fully understood and little is known about its role during sperm maturation process. Therefore, this study was aimed to analyze the expression and regulation of CD52 in the mouse epididymis. Method. Bioinfomatic analyses were perfomed to predict signal peptides and functional domains of CD52. Quantitative real-time RT-PCR was used to analyze tissue distribution, androgen, testicular factors dependency and postnatal development. Results. CD52 amino acid sequence contains a signal peptide, indicating it is a secretory protein. CD52 exhibited region-spesific expression in the epididymis with the highest level was in cauda. Mice CD52 expression was regulated by androgen indicated by a decrease started at day 1 following a gonadectomy. Interestingly, testosterone replacement therapy was able to maintain the expression at 50% of normal level. Experiment by given androgen receptor antagonist, flutamide showed decrease of CD52 expression about 93% than control. It’s confirming that CD52 expression depend on androgen. Moreover, testicular factors also influenced CD52 expression. This was revealed by efferent duct ligation in which CD52 expression was reduced at day 1 to day 5 following the ligation. Finally, CD52 expression was developmentally regulated, this was indicated by increase in the level of expression start at day 15 postnatally. Conclusion: CD52 is a secretory protein and exhibited region-spesific expression in the cauda epididymis. It is regulated by androgen, testicular factors, and also affected by development stage. ]"

"

Latar Belakang: Beberapa gen yang terekspresi spesfik di epididimis diduga

terlibat dalam proses pematangan sperma. Karakteristik gen yang terlibat dalampematangan sperma selain ekspresinya spesifik di epididimis juga dipengaruhioleh androgen, faktor testikuler, dan terekspresi pada saat masa pubertas. Salahsatu famili gen yang cukup banyak ditemukan terekspresi di epididimis adalahBeta Defensin. Gen Beta Defensin diketahui memiliki peran sebagai pertahananterhadap mikroba, namun diduga memiliki keterlibatan dalam proses pematangansperma karena ekspresinya banyak ditemukan di epididimis. Oleh karena itu,penelitian pada gen Beta Defensin terhadap perannya dalam proses pematangansperma perlu dilakukan. Berdasarkan studi sebelumnya diketahui bahwa salahsatu gen Beta Defensin yang terekspresi di epididimis yaitu Beta Defensin 2(Defb2), namun karakterisasi terhadap gen ini belum dilakukan. Dengandemikian, pada penelitian ini bertujuan untuk mengkarakterisasi gen Defb2 terkaitdengan perannya pada proses pematangan sperma.Metode: Analisis bioinformatika digunakan untuk mendapatkan informasi

mengenai struktur gen, signal peptide, dan domain fungsional pada gen Defb2.

Analisis qRT-PCR untuk mengetahui ekspresi relatif gen Defb2 pada berbagai

jaringan, regulasinya oleh androgen, pengaruh dari faktor testikular dan

ekspresinya pada perkembangan postnatal.Hasil: Defb2 merupakan protein sekretori karena memiliki signal peptide. Defb2

memiliki domain fungsional berupa N-myristoylation dan protein kinase-C. Gen

Defb2 terekspresi spesifik di epididimis khususnya pada bagian caput epididimis.

Defb2 ekspresinya dipengaruhi oleh androgen terbukti setelah perlakuan

gonadektomi, ekspresi Defb2 menjadi menurun dan kembali mengalami kenaikan

ketika diberikan testosteron eksogen. Defb2 juga ekspresinya dipengaruhi oleh

faktor testikuler terbukti setelah diberi perlakuan Efferent Duct Ligation (EDL)

maka ekspresi Defb2 langsung menurun bahkan terjadi apoptosis sel sehingga

pola ekspresi gen Defb2 sudah tidak bisa diamati. Begitu juga pada analisis

postnatal development terlihat ekspresi gen Defb2 mulai terdeteksi jelas pada hari

ke-15 yang merupakan masa pubertas mencit jantan.Kesimpulan: Defb2 merupakan gen yang terlibat dalam proses pematangan

sperma di epididimis yang dibuktikan dengan ekspresi spesifik di epididimis,

diregulasi oleh androgen dan faktor testikuler, serta mulai terekspresi pada masa

pubertas.

---

Background: Some of the specific genes expression in the epididymis are

suspected to be involved in the process of sperm maturation. Characteristics of thegenes involved in sperm maturation in the epididymis-specific expression inaddition also influenced by androgens, testicular factors, and expressed at the timeof puberty. One of a family of genes that is pretty much found expressed in theepididymis is a Beta Defensins. Beta Defensin genes known to have a role as adefence against microbes, but suspected to have involvement in the process ofsperm maturation because the expression is found in the epididymis. Therefore,research on Beta Defensin genes against its role in sperm maturation processneeds to be done. Based on previous studies it is known that one of the BetaDefensin genes which expressed in the epididymis that is Beta Defensins 2(Defb2), but the characterization of this gene has not been made against. Thus,this research aims to characterize genes associated with the Defb2 role in theprocess of sperm maturation.Methods: Bioinformatics analysis was used to obtain information about the

structure of genes, signal peptides, and functional domains of the Defb2 gene.

qRT-PCR analysis to find out the relative gene expression of Defb2 on various

tissue, regulation by androgens, the effect of testicular factors and its expression

in postnatal development.Results: Defb2 is a secreted protein because it has signal peptides. Defb2 has a

functional domain in the form of N-myristoylation and kinase-C protein. Specific

genes expression of Defb2 in the epididymis is especially in the caput epididymis.

Defb2 expression influenced by androgens is proven after the gonadectomy, the

expression of Defb2 to be decreased and start increase again when exogenous

testosterone is given. Defb2 also its expression influenced by testicular factors

that proven after being given the treatment by Efferent Duct Ligation (EDL), then

the Defb2 expressions directly decreased and the cell apoptosis occurs even so

that the pattern of gene expression Defb2 already could not be observed. So also

on analysis of postnatal development seen gene expression Defb2 begins to be

detected clearly at day 15 which is a male mice puberty.Conclusions: Defb2 is a gene which is involved in the process of maturation of

sperm in the epididymis that is evidenced by specific expression in the

epididymis, be regulated by androgens and testicular factors, and as well as start

expressed at puberty.

"