Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Telah dilakukan penelitian yang bertujuan untuk melakukan transformasi gen Osdep1-Tc ke kalus padi cv. Taipei 309 menggunakan Agrobacterium tumefaciens. Transformasi gen Osdep1-Tc dilakukan menggunakan A. tumefaciens strain LBA4404 yang membawa plasmid rekombinan pCAMBIA1301-Osdep1-Tc, mengandung gen reporter (gus), gen nptII dan hptI. Gen Osdep1-Tc yang telah dikloning ke vektor pengklonaan pGEM-T Easy pada penelitian sebelumnya digunakan sebagai sampel untuk kemudian isubkloning ke pCAMBIA 1301 dan ditransformasikan ke dalam Escherichia coli DH5α sehingga dihasilkan vektor rekombinan pCAMBIA-Osdep1-Tc. Vektor rekombinan kemudian dielektroporasi ke A. tumefaciens dan ditransformasi ke kalus embriogenik padi. Aktivitas GUS pada kalus berhasil dideteksi 3 hari setelah infeksi dengan A. tumefaciens. Analisis PCR kalus transforman menunjukkan bahwa gen hptI berhasil terintegrasi dengan stabil pada kelima kalus uji.

---

Research about transformation of Osdep1-Tc gene into rice calli cv. Taipei 309 using Agrobacterium tumefaciens had been done. Transformation of Osdep1-Tc was carried out using A. tumefaciens strain LBA4404, harbored recombinant plasmid pCAMBIA1301-Osdep1-Tc, which contained a reporter gene (gus), hptI and nptII gene. Osdep1-Tc gene had been cloned previously into the pGEM-T Easy cloning vector. The gene was being subcloned into pCAMBIA 1301 and transformed into Escherichia coli DH5α in order to obtain recombinant vectors pCAMBIA-Osdep1-Tc. Furthermore, the recombinant vectors was electroporated into A. tumefaciens and transformed into rice embryogenic calli. GUS activity in rice calli was detected 3 days after infection with A. tumefaciens. PCR analysis of the transformant calli revealed that all five calli tested showed a succeeded stable integration of hptI gene."

"Telah dilakukan penelitian yang bertujuan untuk melakukan transformasi gen cry IAc ke dalam kalus padi Inpari 13 dengan bantuan Agrobacterium tumefaciens serta mengetahui pengaruh kombinasi NAA+BAP dan NAA+Kinetin pada tahapan regenerasi. Gen cry IAc merupakan gen yang berperan dalam sintesis δ-endotoksin yang sifatnya sangat toksik pada serangga Lepidoptera. Gen cry IAc ditransformasi ke kalus padi Inpari 13 dengan menggunakan Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 yang membawa plasmid rekombinan pAY560325_cryIAc. Regenerasi kalus padi Inpari 13 hasil trasformasi dilakukan dengan penambahan kombinasi NAA+BAP dan NAA+Kinetin pada media regenerasi. Gen cry IAc berhasil ditransformasi dengan menggunakan metode Agrobacterium tumefaciens. Penggunaan kombinasi NAA+Kinetin menunjukkan regenerasi kalus yang lebih baik dibandingkan dengan kombinasi NAA+BAP.

---

Research about transformation of cry IAc gene into Inpari 13 rice calli using Agrobacterium tumefaciens and Effect of Combination of NAA+BAP and NAA+Kinetin during regeneration process had been conducted. Cry IAc gene encodes δ-endotoxin which is highly toxic to Lepidoptera. Cry IAc gene was transformed into Inpari 13 rice calli using Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 containing recombinant plasmid pAY560325_cryIAc. Regeneration of transformed calli was grown in regeneration media that added by combination of NAA+BAP and NAA+Kinetin. Cry IAc gene had successfully been transformed using Agrobacterium tumefaciens method. The use of combination of NAA+Kinetin showed better calli regeneration than NAA+BAP."

"Telah dilakukan penelitian yang bertujuan untuk melakukan transformasi gen OsERA1 ke kalus padi cv. Taipei 309 menggunakan Agrobacterium tumefaciens. Gen OsERA1 adalah gen yang berperan dalam meningkatkan sensitifitas dari sel penjaga pada stomata terhadap asam absisat. Transformasi gen OsERA1 dilakukan menggunakan Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 yang membawa plasmid rekombinan pCAMBIA1301-OsERA1. Gen OsERA1 telah dikloning sebelumnya pada vektor pengklonaan pGEM-T Easy. Gen dipotong dengan enzim restriksi BamHI dan SalI. Gen diligasikan dengan pCAMBIA 1301 dan ditransformasikan ke dalam Escherichia coli DH5α dihasilkan vektor rekombinan pCAMBIA-ERA1. Plasmid vektor rekombinan pCAMBIA-ERA1 belum berhasil ditransformasi ke dalam Agrobacterium tumefaciens dengan elektroporasi tetapi berhasil dilakukan dengan particle bombardment.

---

Research about transformation of OsERA1 gene into rice calli cv. Taipei 309 using Agrobacterium tumefaciens had been done. OsERA1 gene is a gene that has response to enhance sensitivity of guard cell to absicid acid. Transfer of OsERA1gene into calli was carried out using Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 harboring recombinant plasmid pCAMBIA1301-OsERA1. OsERA1 gene had been cloned previously in the pGEM-T Easy cloning vector and for inserting into pCAMBIA1301, the gene was digested from cloning vector using restriction enzymes BamHI and SalI. Furthermore, the gene was ligated into vector pCAMBIA 1301 and transformed into Escherichia coli DH5α in order to obtain recombinant plasmid pCAMBIA-OsERA1. The recombinant plasmid pCAMBIAOsERA1has not sucessfully transformed with electroporation into Agrobacterium tumefaciens yet, but it can be transformed by particle bombardment method."

"ABSTRAKAgrobacterium sp.merupakan salah satu jenis mikroorganisme yang mampu menghasilkan polisakarida 13-glu~an yang sangat berguna bagi kebutuhan hidup manusia. 13-glukan dapat bermanfat sebagai anti diabetes, anti kanker, anti inflamasi dan juga daging buatan. Penelitian ini bertujuan untuk memproduksi 13-glukan melalui peningkatan galur Agrobacterium sp. dengan mutagenesis secara biologis yaitu menggunakan elemen loncat atau transposon EZ::Tn5 . Transposon EZ::Tn5 adalah suatu segmen DNA yang mempunyai dua Insertion Sequences yang membawa sifat resisten terhadap antimetabolit trimethoprim. Metode pertumbuhan bakteri Agrobacterium sp. dengan media agar pepton yeast, dilanjutkan dengan media selektif untuk produksi 13-glukan. Dilakukan uji nilai ambang letal dalam media yang mengandung trimethoprim, sebelum dilakukan proses elektroporasi Sel bakteri yang akan ditransformasikan sebelumnya dibuat sebagai sel elektrokompeten. Elektroporasi dilakukan menggunakan arus listrik 1200 volt (yang menghasilkan 13 mutan) dan 2400 volt (yang menghasilkan 50 mutan). Hasil penelitian menunjukkan mutagenesis menghasilkan mutan positif dan mutan negatif. Bobot 13-glukan tertinggi diperoleh dari isolat 250.2.16 (voltase 1200 volt) yang dapat ' meningkatkan produksi 13-glukan sebesar 1,16 x lebih besar dibandingkan galur liarnya. lsolat 50.2.A (2400 volt) mampu meningkatkan produksi 13- glukan sampai 654% dibandingkan galur liamya. Semetara mutan negative dihasilkan dari isolat 50.2.4.1 (1200 volt) yang menurunkan produksi 13- glukan: 42,85% dibandingkan liarnya. Dari kondisi elektroporasi 2400 volt dihasilkan mutan negatif isolat 50.2.2 dengan penurunan 88,09% dibandingkan produksi 13-glukan galur liarnya. Uji analisis kimia dilakukan untuk mengetahui kadar glukosa dan protein dalam 13-glukan. Kadar glukosa dan protein tertinggi diperoleh dari isolat 500.2.2.1 hasil elektroporasi 2400 volt yaitu sebesar 5, 798% dengan kadar protein sebesar 50,35%."

"Penelitian mengenai transformasi gen cry IAc ke padi subpesies Indica, Inpari 13, IR 64, dan Inpari 6, menggunakan Agrobacterium tumefaciens telah dilakukan, namun tanaman transgenik belum berhasil diperoleh. Gen cry IAc merupakan salah satu kelompok gen cry 1 yang memiliki toksin paling tinggi terhadap hama Lepidotera khususnya hama penggerek batang. Transformasi gen cry IAc dilakukan ke kalus padi menggunakan Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 yang membawa plasmid pAY560325_cryIAc. Kalus padi ditumbuhkan dalam media induksi kalus N6D selama 5 hari sebelum diinfeksi dengan Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404. Selanjutnya, kalus ditanam dalam media resting, seleksi, dan media regenerasi. Gen cry IAc dan hptII telah dikonfirmasi menggunakan teknik isolasi DNA dan PCR. Transformasi gen cry IAc berhasil dilakukan dan terdapat perbedaan respons diantara ketiga varietas terhadap perlakuan kultur jaringan dan transformasi. Inpari 13 memberikan respons terbaik terhadap perlakuan transformasi berdasarkan hasil PCR gen cry IAc dan gen hptII, sedangkan IR 64 memberikan respons terbaik terhadap perlakuan kultur jaringan berdasarkan jumlah kalus embriogenik pada media induksi kalus.

---

Transformation of Cry IAc Gene Treatment Mediated by Agrobacterium tumefaciens

Research about transformation of cry IAc gene into subspesies Indica rice, Inpari 13, IR 64, and Inpari 6, had been conducted, but transgenic plant have not been yet obtained. Cry IAc is one of the group cry 1 gene with the highest toxin to pest of Lepidoptera especially stem borer. Transformation of cry IAc gene was conducted using Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404 harboring plasmid pAY560325_cryIAc. Callus were grown in N6D induction media for 5 days before transformed by soaking in culture of Agrobacterium tumefaciens LBA4404. Subsequently, callus were grown in resting, selection, and regeneration medium. Cry IAc and hptII genes were confirmed through DNA extraction and PCR methods. Transformation of cry IAc gene successfully conducted and there were different responses of those varieties to tissue culture and transformation treatment. Inpari 13 showed the best response to transformation treatment based on the result of PCR of cry IAc and hptII genes, IR 64 gave the best response to tissue culture treatment based on the amount of embriogenic callus at callus induction medium."

"Tanaman teh (C. sinensis) banyak manfaat da1am kesehatan tubuh antara lain untuk mencegah pertumbuhan sel-sel kanker, menurunkan tekanan darah tinggi, mengurangi penyakit degenerativ, serta untuk penyegar tubuh. Hal ini disebabkan pada organ tanaman yakni daun dan pucuk batangnya mengandung bahan alami seperti tannin, theobromin, theophyllin, cafein serta mineral. Penanaman jaringan daun teh menghasilkan kalus berwarna putih kekuningan dan bertekstur kompak pada medium 1/2 MS 1962 yang diperkaya dengan 2 ppm 2,4D dan 3 ppm kinetin. Transformasi genetik dengan bantuan Aarobacterium tumefaciens dapat mengurangi penggunaan fitohormon dan zat pengatur tumbuh untuk meningkatkan pertumbuhan dan kandungan bahan alami(senyawa metabolit sekunder). Hal ini disebabkan bakteri tersebut mempunyai plasmid yang mengandung gen nopalin sintase dan octopin sintase disamping gen virulen sehingga terjadi tumorgenesis ataupun perbanyak perakaran dan pertunasan. Inokulasi A. tumefaciens pada kadar 5 x 10^5 dan 5 x 10^6 sel/ml dapat meningkatkan. pertumbuhan kalus dari 8,5624 g menjadi 13,0053 g dan kandungan tannin dari 0,0837 g menjadi 0,1389g. Sedangkan pada kadar 5 x 10^3; 5 x 10^4 sel/ml secara statistik tidak berbeda nyata. Dengan demikian kalus daun teh dapat digunakan sebagai sumber tannin secara alternativ."