Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"ELISA merupakan metode alternatif untuk mendeteksi residu tetrasiklin pada produk hewan. Síntesis imunogen tetrasiklin dan produksi antibodi anti tetrasiklin merupakan dua tahapan penting yang harus dilakukan jika ingin melakukan analisis residu tetrasiklin dengan metode ELISA. Metode tolidin dan metode NCS dapat digunakan untuk mensintesis imunogen tetrasiklin. Imunogen TC-Tolidin-BSA berwarna ungu dan menyerap pada dua λ maks yaitu 277 nm dan 491 nm, sedangkan imunogen TC-NCS-BSA berwarna kuning kecoklatan dan menyerap pada dua λ maks yaitu 278 nm dan 322 nm. Hasil KLT dan HPLC menunjukan bahwa kedua imunogen yang dihasilkan cukup murni. Dari hasil SDS-PAGE dapat diperkirakan BM dari TC-Tolidin-BSA adalah sebesar 71.219 Da sedangkan BM TC-NCS-BSA sebesar 70.501 Da. Nilai BM dari kedua imunogen tetrasiklin lebih besar dibandingkan BM dari BSA (berbanding terbalik dengan Rf), hal ini menunjukkan bahwa imunogen sudah terbentuk. Produksi antibodi anti tetrasiklin dilakukan dengan cara imunisasi imunogen TC-Tolidin-BSA dan TC-NCS-BSA pada perbandingan 1:75 terhadap kelinci white New Zealand berkelamin jantan. Purifikasi antibodi dilakukan dengan protein A sepharose yang spesifik mengikat IgG. Konsentrasi IgG tertinggi dari kedua imunogen terdapat pada fraksi 1, yaitu sebesar 10.93 mg/mL untuk imunogen TC-Tolidin-BSA dan 10.61 mg/ mLuntuk TC-NCS-BSA. Hasil SDS-PAGE terhadap antibodi menunjukkan bahwa IgG terurai menjadi 2 pita (rantai ringan dan rantai berat).

---

ELISA is an alternative method for detecting tetracycline residues in animal products. This method has been known as rapid, sensitive, specific, and cost-effective analysis. Synthesis of tetracycline immunogen and production of anti-tetracycline antibody are two important steps which must be done if we like to analysis of tetracycline residues with ELISA. Tolidine and NCS methods applicable to synthesis of tetracycline immunogens. Tolidine method produce a purple immunogen (TC-Tolidine-BSA) and absorb at two maximum wavelength (277 nm and 491 nm), while NCS method produce a yellowish-brown immunogen (TC-NCS-BSA) and absorb at two maximum wavelength (278 nm and 322 nm). TLC and HPLC result show that both of immunogens have good purity because have not contain free tetracycline and residue of reagent. From result of SDS-PAGE can be estimated molecular weight (MW) of TC-TOLIDINBSA equal to 71.219 Da while MW of TC-NCS-BSA equal to 70.501 Da. The value of MW from both of immunogens is higher than BSA (smaller Rf), this fact indicate that immunogen have been formed. Anti-tetracycline antibody produced by immunizing of immunogens at comparison of the same concentration BSA and Tetrasiklin ( 1:75) to male white New Zealand rabbit. The antibody purified by protein A sepharose that specific coating IgG. The highest concentration of IgG from both immunogen list on fraction 1 (10.93 mg/mL for TC-Tolidin-BSA dan 10.61 mg/ mL for TC-NCS-BSA). SDS-PAGE result show that IgG has been divided into two band (heavy chains and light chains)."

"Terdapat banyak metode untuk mendeteksi kontaminasi melamin dalam makanan atau produk pakan termasuk immunoassay. Dalam penelitian ini, hapten melamin disintesis dengan mereaksikan 2-kloro-4,6-diamino-1,3,5-triazina (CAAT) dengan asam 6-aminokaproat. Karakterisasi hapten dengan spektrometer Fourier Transform Infrared (FTIR) menunjukkan absorpsi ikatan N-H dari gugus amina sekunder alifatik pada frekuensi 3350-3310 cm-1 dan vibrasi ulur ikatan C-N pada daerah sidik jari 1250-1020 cm-1. Karakterisasi dengan 1H-NMR menunjukkan pergeseran kimia pada 4,20 ppm (t, 1H), sedangkan dengan 13C-NMR pada pergeseran kimia 139 ppm. Karakterisasi dengan spektrometer massa menunjukkan M+. m/z 240,4 untuk hapten (C9H16N6O2). Imunogen disintesis dengan cara menkonjugasikan hapten dengan bovine serum albumin (BSA) dengan menggunakan metode ester aktif. Konjugat hapten-BSA menyerap panjang gelombang maksimum UV pada 224 nm. Data menunjukkan bahwa hapten dan imunogen berhasil disintesis. Hapten-BSA kemudian disuntikkan ke kelinci untuk menghasilkan antibodi poliklonal. Setelah tiga minggu imunisasi, serum menunjukkan adanya antibodi melalui Gel Agarose Precipitation Test (AGPT). Dari hasil optimasi awal indirect ELISA diketahui konsentrasi optimum coating antigen hapten-OVA adalah 1 μg/mL dan konjugat HRP-anti rabbit IgG adalah 1:10.000. Dari hasil indirect competitive ELISA diperoleh bahwa pengenceran optimum antibodi yang masih memberikan respon positif berupa absorbansi yang tinggi adalah 1:125 (6 μg/mL). Antiserum yang dihasilkan memiliki sensitivitas yang cukup baik terhadap melamin dengan nilai IC50 sebesar 2,83 ppm dan limit deteksi (IC15) sebesar 0,22 ppm melalui indirect competitive ELISA.

---

There are many method to detect the melamine contamination in food or feed product including immunoassay. In this study, hapten of melamine was synthesized by reacting 2-chloro-4,6-diamino-1,3,5-triazine (CAAT) and 6-aminocaproic acid. Characterization of hapten with fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) showed secondary N-H stretching vibrational band at 3350-3310 cm-1 and C-N stretching vibrational band at fingerprint region 1250-1020 cm-1. Characterization of hapten with 1H-NMR showed chemical shift at 4,20 ppm (t, 1H), and 139 ppm by 13C-NMR. Hapten also characterized with high-resolution mass spectrometry (HRMS) that showed M+. m/z 240,4 for hapten (C9H16N6O2). The Immunogen was prepared by coupling hapten to bovine serum albumin (BSA) using the active ester method. Hapten-BSA conjugate showed the maximum wavelength of UV absorpstion at 224 nm. The data pointed out that hapten and immunogen was successfully synthesized. Hapten-BSA conjugate then injected into rabbit to produce the polyclonal antibodies. After three weeks immunization, serum showed the presence of antibodies through Agar Gel Precipitation Test (AGPT). The initial optimization of indirect ELISA showed that the optimum concentration of coating antigen hapten-OVA was 1 mg/mL and HRP-conjugated anti-rabbit IgG was 1:10,000. The optimum antibody dilution that still gave a positive response was 1:125 (6 mg/mL) through indirect competitive ELISA. Antiserum produced has a good sensitivity to melamine with IC50 2.83 ppm and a detection limit (IC15) 0.22 ppm using indirect competitive ELISA."

"Indonesia merupakan negara dengan beban TB terbesar kedua di dunia. Prevalensi infeksi penyerta jamur paru juga tinggi, salah satunya aspergilosis paru kronik (APK). Alat diagnostik yang baik dan mudah digunakan sangat diperlukan untuk menunjang diagnosis APK, namun data terkait hal tersebut di Indonesia masih terbatas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui nilai performa diagnostik deteksi antibodi spesifik Aspergillus berbasis ELISA manual dan otomatis pada pasien TB paru. Penelitian ini merupakan uji diagnostik untuk membandingkan hasil deteksi antibodi spesifik Aspergillus berbasis ELISA menggunakan metode manual dan otomatis dari sera pasien TB paru yang diperiksa di Laboratorium Parasitologi FKUI. Dari 62 subjek yang memenuhi kriteria inklusi, 56,5% pasien adalah perempuan. Median usia pasien adalah 34 tahun dengan nilai minimum 16 dan nilai maksimum 72. Proporsi hasil positif ELISA manual adalah 12,9%, sedangkan proporsi hasil positif ELISA otomatis adalah 29%. Metode ELISA manual memiliki nilai performa diagnostik 20% untuk sensitivitas, 90,48% untuk spesifisitas, 61,5% untuk nilai duga positif, dan 59,79% untuk nilai duga negatif. Adapun ELISA otomatis memiliki nilai performa diagnostik 70% untuk sensitivitas, 90,48%untuk spesifisitas, 84,83% untuk nilai duga positif, dan 79,86% untuk nilai duga negatif. Kemampuan diagnostik ELISA manual tidak sebaik otomatis, namun dapat dipertimbangkan sebagai alat diagnosis penapisan yang lebih mudah diakses, khususnya di daerah dengan sumber daya terbatas. Perlu dilakukan penelitian lanjutan mengenai cut-off ELISA manual yang sesuai untuk populasi Indonesia.

---

Indonesia is a country with the second largest TB burden in the world. The prevalence of pulmonary fungal infections is also high, one of which is chronic pulmonary aspergillosis (CPA). A good and easy-to-use diagnostic tool is needed to aid CPA diagnosis. This study aims to determine the diagnostic performance value of Aspergillus-specific antibody detection based on manual and automatic ELISA on pulmonary TB patient’s serum carried out at Parasitology Laboratory FMUI. This diagnostic test study compared the results of Aspergillus-specific antibody detection in pulmonary TB patient’s sera based on ELISA using manual and automatic methods. Of the 62 subjects who met the inclusion criteria, 56.5% of the patients were women. The median age of the patients was 34 years with a minimum value of 16 and a maximum value of 72. The proportion of positive results for manual ELISA was 12.9%, while the proportion of positive results for automatic ELISA was 29%. Manual ELISA has a diagnostic performance value of 20% for sensitivity, 90.48% for specificity, 61.5% for a positive predictive value, and 59.79% for a negative predictive value. Meanwhile, automatic ELISA has a diagnostic performance value of 70% for sensitivity, 90.48% for specificity, 84.83% for a positive predictive value, and 79.86% for a negative predictive value. Manual ELISA diagnostic capabilities are not as good as automated one but can be considered as a screening diagnostic tool as it is more accessible, especially in areas with limited resources. It is necessary to study the appropriate cut-off on manual ELISA Indonesian population."

"Bawang putih (A ilium sativum Linn ) daii basil penelitian terdahulu terbukli mentpunyai kemampuan untuk melindungi hail daii keracunan yang ditixnbulkan oleh kathon tetraldoiida secara in vivo. Peneliuian kali mi akan dilakukan secara in vitro terhadap se darah merah domba, untuk rnengetahui apakah sari air bawang putih tersebut benar-benar dapat mempettahankan kadar glutation dan hemoglobin yang ada tanpa dipengaruhi oleh metabolisme di dalam tubuh. Sel darah merah domba di bagi daiam 3 kelompok perlakuan. Kelompok I adalah kelompok kontrol (Sel darah merah tanpa perlakuan). Kelompok II adalah kelompok sel darah merah yang dibeii t-butil hidroperoksida 2 mM. Kelompok III adalah kelompok sel darah merah yang dibeii sari air bawang putih dan t-butil hidroperoksida 2 mM. Kelompok IV adalah kelompok sel darah merah yang diberi sari air bawang pulih saja. Ketiga kelompok pertama digunakan untuk pengukuran methemoglobin dan glutation, sedangkan kelompok IV untuk pengukuran glutation saja. Hasil penelitian menunjukkan bahwa path pengukuran kadar methemoglobin antara kelompok II dan kelompok III tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna serta antara kelompok I dan kelompok III menunjukkan perbedaan yang bennakna. Hasil pengukuran kadar glutation menunjukkan bahwa antara kelompok I, II dan UI menunjukkan perbedaan yang bermakna. Maka dapat disimpulkan bahwa pembeiian sari air bawang putih kurang dapat melindungi hemoglobin terhadap stres oksidasi, tetapi dapat melindungi glutation dan pengaruh oksidasi oleh t-butil hidroperoksida. "

"[ABSTRAKAeromonas hydrophila merupakan foodborne dan waterborne patogen, yang banyakditemukan pada lingkungan perairan. Bakteri ini dapat menginfeksi manusia, hewanteresterial dan hewan air seperti ikan mas, Infeksi A. hydrophila dapat mengakibatkankomplikasi gastrointestinal dan non-gastrointestinal pada manusia dengan penularanterjadi secara oral maupun luka yang terinfeksi bakteri. Sedangkan infeksi A.hydrophila pada ikan mas dapat menjadi sumber penularan ke manusia danmengakibatkan kematian ikan mas budidaya yang berdampak pada kerugian ekonomi.Hingga saat ini informasi mengenai infeksi A. hydrophila pada manusia masih jarangdilaporkan. Hal tersebut dapat terjadi karena hingga saat ini metode diagnosa antibodianti A. hydrophila belum banyak berkembang, sedangkan uji kekebalan penting bagiskrining, diagnosa banding dan uji konfirmasi terhadap infeksi A. hydrophila. Untukitu penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan metode ELISA dan uji deteksicepat berdasarkan modifikasi ELISA menggunakan imunostik untuk mendeteksiantibodi anti A. hydrophila. Sebagai hewan uji digunakan enam ekor kelinci (NewZeland White) dan enam ekor ikan mas (Cyprinid carpio) yang diimunisasi denganantigen sel utuh bakteri A. hydrophila yang diiaktivasi dengan formalin 0,3%.Imunisasi pada ikan mas dilakukan secara intraperitoneal, diulang satu minggu setelahimunisasi pertama, sedangkan imunisasi pada kelinci dilakukan satu kali denganemulsi antigen dan Freund?s complete adjuvant kemudian dilanjutkan dengan dua kalibooster menggunakan emulsi antigen dan Freund?s incomplete adjuvant. Koleksiserum hewan uji dilakukan setiap minggu hingga minggu ke-6 dari koleksi serumpertama. Hasil optimasi terhadap uji ELISA menunjukkan bahwa uji ELISA yangdikembangkan mampu mendeteksi antibodi anti A. hyrophila, demikian pula denganimunostik yang dirakit mampu memdeteksi antibodi anti A. hyrophila pada serum ikanmas dan kelinci.

---

ABSTRACTAeromonas hydrophila is foodborne and waterborne pathogens. The bacteria thatoccur ubiquitously and autochthonously in aquatic environments. These bacteria caninfect humans, animals terrestrial and aquatic animals such as goldfish, infection of A.hydrophila can lead to complications of gastrointestinal and non-gastrointestinalinfection in humans and transmitted by oral and infected wounds contamination. Theinfected carp with A. hydrophila is a source of transmission to humans, resulting in thedeath of farmed fish that have an impact on economic disadvantage. Till now there arelacking information of A. hydrophila infection in humans reported. This can be occurbecause to the current diagnostic methods antibodi A. hydrophila undeveloped, whilethe immunity test is important for screening, differential diagnosis and confirmationtest of A. hydrophila infection. Therefore, the aims of this research is to developELISA methods and rapid detection test based on the modified ELISA usingimunostick to detect antibodies against A. hydrophila. For animals models, 6 rabbits(New Zeland White) and 6 carp (Cyprinid carpio) were immunized with whole cellantigen A. hydrophila bacteria which inactivated using 0.3% formalidehide. Carpimmunized intraperitoneally with antigen, and repeated one week after the firstimmunization, whereas immunization in rabbits done once with antigen emulsion andFreund's complete adjuvant followed by two booster using emulsion of antigen andFreund's incomplete adjuvant. Collection of animal serum done every week, till thesixth week from the first serum collection. The results of the optimization of theELISA test showed that the developed ELISA test is able to detect antibodies againstA. hyrophila, as well as the assembled imunostik capable to detect antibodies againstA. hyrophila both in carp and rabbit serum respectively, Aeromonas hydrophila is foodborne and waterborne pathogens. The bacteria thatoccur ubiquitously and autochthonously in aquatic environments. These bacteria caninfect humans, animals terrestrial and aquatic animals such as goldfish, infection of A.hydrophila can lead to complications of gastrointestinal and non-gastrointestinalinfection in humans and transmitted by oral and infected wounds contamination. Theinfected carp with A. hydrophila is a source of transmission to humans, resulting in thedeath of farmed fish that have an impact on economic disadvantage. Till now there arelacking information of A. hydrophila infection in humans reported. This can be occurbecause to the current diagnostic methods antibodi A. hydrophila undeveloped, whilethe immunity test is important for screening, differential diagnosis and confirmationtest of A. hydrophila infection. Therefore, the aims of this research is to developELISA methods and rapid detection test based on the modified ELISA usingimunostick to detect antibodies against A. hydrophila. For animals models, 6 rabbits(New Zeland White) and 6 carp (Cyprinid carpio) were immunized with whole cellantigen A. hydrophila bacteria which inactivated using 0.3% formalidehide. Carpimmunized intraperitoneally with antigen, and repeated one week after the firstimmunization, whereas immunization in rabbits done once with antigen emulsion andFreund's complete adjuvant followed by two booster using emulsion of antigen andFreund's incomplete adjuvant. Collection of animal serum done every week, till thesixth week from the first serum collection. The results of the optimization of theELISA test showed that the developed ELISA test is able to detect antibodies againstA. hyrophila, as well as the assembled imunostik capable to detect antibodies againstA. hyrophila both in carp and rabbit serum respectively]"