Gen Oryza sativa NAC6 (OsNAC6) merupakan gen pengkode faktor
transkripsi OsNAC6 yang terinduksi cekaman kekeringan pada tanaman padi
(Oryza sativa L.). Tujuan penelitian adalah mengisolasi dan mengklona gen
OsNAC6 dari tanaman padi kultivar Rojolele dan Batutegi. Penelitian
dilakukan di Laboratorium Biologi Molekular Padi Puslit Bioteknologi LIPI
selama 10 bulan (Februari--November 2008). Fragmen gen tersebut
diperoleh dari proses sintesis dan amplifikasi cDNA OsNAC6 sampel kultivar
Rojolele dan Batutegi dengan teknik RT-PCR. Fragmen tersebut kemudian
diligasi ke dalam plasmid pGEM-T Easy (3.015 pb) untuk mendapatkan
plasmid rekombinan yang diklona ke dalam Escherichia coli DH5α. Plasmid
rekombinan yang telah berhasil diklona selanjutnya diisolasi dan disekuen.
Hasil analisis BLAST menunjukkan sekuen gen OsNAC6 dari kedua sampel
tersebut memiliki similaritas nukleotida sebesar 99% dan similaritas asam
amino sebesar 100% dengan sekuen acuan [GenBank Accession Number
AB028185], yaitu coding sequence lengkap dari mRNA Oryza sativa L.
pengkode protein OsNAC6. Analisis restriksi dan Southern blot menunjukkan
adanya pola sesuai prediksi, yaitu pola pita berukuran 11.702 pb
(pemotongan dengan enzim BglII), 3.142 pb dan 2.580 pb (pemotongan
dengan enzim EcoRI). Akan tetapi, terdapat tambahan pola pada hasil
Southern blot, yaitu pola pita berukuran sekitar 9,5 kpb (pemotongan dengan
enzim EcoRI) dan 1 kpb (pemotongan dengan enzim BglII), yang diduga sebagai kerabat dekat gen OsNAC6. Gen OsNAC6 berukuran 912 pb
berhasil diisolasi dari tanaman padi kultivar Rojolele dan Batutegi serta
diklona ke dalam Escherichia coli DH5α.